[发明专利]一种L-丝-L-酪环二肽和D-丝-L-酪环二肽的分离提纯方法

权利要求书

1.一种L-丝-L-酪环二肽和D-丝-L-酪环二肽的分离提纯方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）将穿山甲药材砂炒炮制为炮山甲或醋山甲；

（2）将炮山甲或醋山甲打粉，过100目筛，然后通过第一溶剂提取后脱脂得到提取液和药渣，将第一溶剂提取后的药渣再通过第二溶剂提取得到提取液，将两次的提取液合并，减压浓缩得到浸膏；

所述第一溶剂为二氯甲烷，将炮山甲或醋山甲粉加入5-10倍量的二氯甲烷提取3-5次，每次1小时；

所述第二溶剂为浓度为50wt%的乙醇，将药渣加入5-10倍重量份的50%乙醇提取4-5次，每次1小时；

（3）将浸膏用甲醇溶解拌硅胶上柱，固定相为200-300目硅胶，流动相为二氯甲烷：丙酮：乙醇体积比为1-20:1-2:1洗脱，并用TLC碘显色监控，合并二氯甲烷-丙酮-乙醇的体积比为10:2:1的流份；

（4）将步骤（3）得到的流份用反相高效液相色谱纯化，以乙腈-水流动相，洗脱液减压浓缩除去乙腈和水，干燥，得到L-丝-L-酪环二肽和D-丝-L-酪环二肽。

2.根据权利要求1中所述的一种L-丝-L-酪环二肽和D-丝-L-酪环二肽的分离提纯方法，其特征在于：所述步骤（3）中每10g浸膏用50ml甲醇溶解，用20g硅胶拌匀。

3.根据权利要求1中所述的一种L-丝-L-酪环二肽和D-丝-L-酪环二肽的分离提纯方法，其特征在于：所述步骤（4）中反相高效液相色谱条件为：柱温30℃，检测波长210nm或230nm。

4.根据权利要求1中所述的一种L-丝-L-酪环二肽和D-丝-L-酪环二肽的分离提纯方法，其特征在于：所述步骤（4）中乙腈-水流动相为浓度为1-4wt%乙腈水溶液，洗脱液洗脱流速为2-6ml/min，洗脱时间20-60分钟。