[发明专利]一种黑腹果蝇GMRSnail细胞死亡模型的建立方法

说明书

本发明公开一种果蝇GMRSnail细胞死亡模型的建立方法，将基因型为+;GMR‑Gal4^W/SM6B‑TM6B.Tb的GMR‑Gal4果蝇品系与基因型为w¹¹¹⁸;UAS‑Snail^74b的UAS‑Snail^74b果蝇品系进行杂交，选择正常，非短粗的后代基因型为UAS‑Snail^74b/+;GMR‑Gal4^W/+的果蝇，即为GMRSnail细胞死亡模型。本发明所构建的黑腹果蝇GMRSnail细胞死亡模型，可以用于涵盖果蝇全基因组的RNA干扰（RNAi）品系库的大规模遗传筛选，以期寻找介导Snail诱导的细胞死亡的全新调控因子。这有助于研究者进一步了解发育过程中不同细胞因子或信号通路的相互作用，构建和完善调控细胞死亡的信号转导网络，为癌症等疾病的防治提供新的药物靶点和治疗方案。

技术领域

本发明属于生物遗传学技术领域，具体涉及一种黑腹果蝇GMRSnail细胞死亡模型的建立方法。

背景技术

果蝇遗传学操作系统，有Gal4/UAS双表达系统。Gal4/UAS双表达系统：Gal4/UAS系统是果蝇中最为常用的转基因技术体系，可以让外源基因或RNAi在特定细胞或组织选择性表达。半乳糖调节上游启动子元件（galactose-regulated upstream promoter element4），缩写Gal4，是酵母中类似于原核生物乳糖操纵子的一个转录激活子。上游激活序列UAS（upstream activate sequense），是酵母中另一种类似高等真核生物增强子的序列。Gal4通过与UAS相结合，调节与半乳糖代谢相关基因的表达。1993年，科学家将目的基因X连接在UAS之后，通过转基因技术建立UAS-X果蝇品系，然后与特定的Gal4果蝇品系杂交，在后代中就可以得到同时具有Y-Gal4和UAS-X的果蝇，从而实现特异性的在Y组织表达X基因（参考文献1，Brand A. H. and Perrimon N., Targeted gene expression as a means ofaltering cell fates and generating dominant phenotypes. Development, 1993,118: 401-15）。因为果蝇基因组不编码Gal4转录因子，所以在果蝇体内过量表达Gal4，不会对果蝇的发育产生显著的影响。同样，在果蝇体内插入UAS调控序列，也不会对果蝇产生影响。这个系统的建立为利用果蝇作为研究模型的科学家在实验设计上提供了有利、便捷、高效的遗传操作工具。Gal4/UAS双表达系统示意图如图1所示。

果蝇作为研究人类疾病的模式生物, 与哺乳动物不仅在基本的生物学、生理学和神经系统机能等方面比较相似, 而且果蝇有其作为模式生物的独特优势。近年来的研究表明, 果蝇和人类在肿瘤发生信号通路等方面的保守性很高, 而且果蝇具有很强的遗传学可操作性, 是肿瘤学研究有效的模型之一, 可用于研究人类肿瘤发生、发展、转移等分子机制。近年来研究人员已经建立了很多用于研究特定的果蝇模型，但是新的特定的果蝇模型的建立对阐明疾病发生的分子机制起到重要作用，将会为更多疾病的临床治疗提供新的药物靶点和治疗方案。因此，建立新的特定的果蝇模型是本领域技术人员亟待解决的技术问题。

发明内容