[发明专利]一种甘薯查尔酮异构酶IbCHIL1及其编码基因和应用在审
| 申请号： | 201810053230.2 | 申请日： | 2018-01-19 |
| 公开（公告）号： | CN108239650A | 公开（公告）日： | 2018-07-03 |
| 发明（设计）人： | 徐靖;朱红林;韩义胜;王效宁;唐力琼;张更武;陈明阳 | 申请（专利权）人： | 海南省农业科学院粮食作物研究所 |
| 主分类号： | C12N15/61 | 分类号： | C12N15/61;C12N9/90;C12N15/10;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/00 |
| 代理公司： | 北京德崇智捷知识产权代理有限公司 11467 | 代理人： | 律涛 |
| 地址： | 571100*** | 国省代码： | 海南;46 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 核苷酸序列 甘薯 查尔酮异构酶 氨基酸序列 功能蛋白质 编码基因 基因 查尔酮异构酶基因 应用 植物生物技术 同等功能 氨基酸 花青素 同源性 替换 生物技术 转入 调控 | ||
1. 一种甘薯查尔酮异构酶基因IbCHIL1，其特征在于，该基因的核苷酸序列包括：
SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列；或
SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列经取代、缺失和/或增加一个或多个且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列；或
与(a)或 (b)的核苷酸序列具有90%以上同源性且表达相同功能蛋白质的核苷酸序列。
2.一种甘薯查尔酮异构酶IbCHIL1，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示；或为SEQ ID NO:2经替换、缺失或添加一个或几个氨基酸形成具有同等功能的氨基酸序列。
3.一种如权利要求1所述的甘薯查尔酮异构酶基因IbCHIL1的克隆方法，其特征在于，包含如下步骤：
(1) 设计特异引物P1正向引物和P2反向引物；
(2) 以甘薯紫肉块根第一链cDNA为模板对IbCHIL1基因的CDS序列进行PCR扩增；
(3) 将扩增获得的PCR产物连接pMD18-T载体，转化大肠杆菌感受态细胞，筛选阳性克隆并测序。
4.根据权利要求3所述的一种甘薯查尔酮异构酶基因IbCHIL1的克隆方法，其特征在于，步骤(1)中所述的P1正向引物的序列如SEQ ID NO:3所示，所述P2反向引物的序列如SEQID NO:4所示。
5.根据权利要求3或4所述的一种甘薯查尔酮异构酶基因IbCHIL1的克隆方法，其特征在于，步骤(2)中所述的PCR扩展条件为：94℃预变性5 min；94℃变性30 sec，53℃退火30sec，72℃延伸1 min，共35个循环；72℃延伸8 min。
6.一种如权利要求1所述甘薯查尔酮异构酶基因IbCHIL1的应用，其特征在于，将该基因应用于真核或原核表达。
7.一种如权利要求1所述甘薯查尔酮异构酶基因IbCHIL1的应用，其特征在于，将该基因通过转基因技术用于提高甘薯花青素含量的。
8.一种重组表达载体或表达盒，其特征在于，其含有如权利要求1所述的甘薯查尔酮异构酶基因IbCHIL1。
9.一种转基因细胞系或重组菌，其特征在于，其含有如权利要求1所述的甘薯查尔酮异构酶基因IbCHIL1。
10.一种宿主细胞，其特征在于，其含有如权利要求1所述的甘薯查尔酮异构酶基因IbCHIL1。
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