[发明专利]从甘草中分离纯化水溶性总黄酮的方法

说明书

本发明公开了一种从甘草中分离纯化水溶性总黄酮的方法，包括以下步骤：1)低碳醇提取：称取甘草原料，加入低碳醇，在60～90℃下提取2～3次，合并甘草提取液并进行浓缩，得到浓缩液；2)向浓缩液中加入无机酸调节pH值至2～4，再过滤得到滤液；3)向滤液中加入碱调节pH值至6～9；4)大孔树脂纯化：将滤液经过大孔树脂吸附、洗脱、洗脱液浓缩、干燥处理后，制得水溶性总黄酮。本发明分离纯化得到的甘草黄酮是一种水溶性总黄酮，解决了甘草黄酮难溶于水的问题；本发明分离纯化得到的水溶性甘草黄酮的纯度大于50％；本发明产品收率高，工艺路线简单，适合工业化生产，且生产成本低。

技术领域

本发明涉及甘草中黄酮的分离纯化技术领域，特别涉及一种从甘草中分离纯化水溶性总黄酮的方法。

背景技术

甘草是豆科甘草属植物的根和根状茎，是最常见的中草药和经济植物。甘草黄酮是甘草中最重要的活性成分之一，已发现黄酮类化合物150多种，它们分别属于黄酮类、黄酮醇类、异黄酮类、查尔酮类、二氢黄酮类、二氢查尔酮类等十几大类。黄酮类化合物具有抗癌、防治病毒性肝炎、抗艾滋病、增强机体免疫、抗肿瘤、抗氧化、保肝功能等广泛的药理作用之外,是食品工业中理想的抗氧化剂、防腐剂，有良好的生物活性。甘草黄酮是现有化学防腐剂的优良替代品，我国食品添加剂使用卫生标准(GB2760)规定：甘草抗氧化剂可用于油脂、油炸食品、腌制鱼、肉制品、饼干、方便面、含油食品。

甘草黄酮还广泛应用于医药、保健及美容等行业，在化妆品应用中，甘草黄酮有很好的抗氧化性，能深入皮肤内部并保持高活性，有效抑制黑色素生成过程中多种酶的活性，其美白祛斑效果显著。另外甘草黄酮还具有防止皮肤粗糙和抗炎作用，甘草黄酮在美容化妆品中有多种功效。甘草黄酮有抑制酪氨酸酶活性、清除氧自由基的功效，能抑制多巴色素互变酶和DHICA氧化酶的活性。其抗氧化能力与维生素E比较接近。有与过氧化物歧化酶(SOD)相似的清除氧自由基的能力，具有快速、高效、安全的美白、祛斑功能。其美白功能优于熊果苷等其它合成的美白化合物。甘草黄酮在医药上还具有抗肿瘤、抗HIV、保肝、抗溃疡和抗心律失常的作用。

通常将甘草黄酮加入复方美白褪斑液中，临床治疗下列皮肤问题：1.黄褐斑(黎黑斑)；2.使用各种化学制剂化妆品导致的接触性皮炎；3.由身体血热偏盛，加之饮食不节、外邪侵袭、血郁痰结所导致的寻常性座疮；4.日光性及药物性皮炎；5.由肾水不足外搏而致的雀斑；甘草黄酮优异的美自功效和安全性、使其在美白化妆品中得到广泛的应用，但因为黄酮类成分一般而言大多数是油溶性物质，在水溶液中溶解度极小，而多数化妆品的基料是水性的，脂溶性黄酮的油溶性特性使其在化妆品中的配伍和应用仍然受到了较大的局限。如能通过特定的分离纯化技术从甘草中分离纯化出水溶性黄酮，就能大大增加甘草黄酮在美白化妆品中的应用。

目前所涉及甘草黄酮的分离纯化主要包括下述几种方法：

(1)溶剂萃取法：论文“溶剂萃取法分离水溶性甘草黄酮”(《过程工程学报》，1997，7(3)：4496-500)公开了采用溶剂萃取法实现了甘草浸提液中水溶性黄酮和甘草酸的分离，但此法萃取不完全，所得甘草黄酮的纯度不高，萃取率只有35％，因而不利于工业化生产。

(2)色谱联用技术：论文Flavonoids from Glycyrrhiza pallidiflora hairyroot cultures(J PH值ytochemistry，2001，58(4)：592-598)涉及的色谱联用技术多用于中草药单体成分的分离及结构鉴定。日本学者就应用色谱技术从甘草浸膏、甘草毛根培养物中提取分离得到多种甘草黄酮类化合物，操作复杂。

(3)大孔树脂法：论文“大孔吸附树脂分离纯化甘草总黄酮工艺研究”(中国药房，2006，17(1)：1355-1357)涉及的树脂吸附法是将中药水提液、醇提液直接或经浓缩得浸膏后溶解于溶剂中，再上大孔树脂柱，以适当溶剂洗脱并收集，从而对中药有效成分达到提取分离，近年来广泛应用于天然产物的提取分离，根据孔径、比表面及构成类型分为多种类型。应雪等人经试验筛选得出AB-8型大孔吸附树脂对甘草总黄酮具有良好的分离纯化效果，纯度为50％左右。