[发明专利]一种中药饮片卡那霉素抗体的配方及制备工艺

说明书

本发明公开了一种中药饮片卡那霉素抗体的配方及制备工艺，按照重量份数由如下原料组成：硫酸卡那霉素58‑80份、牛血清白蛋白5‑25份、卵清白蛋白3‑5份、弗氏完全佐剂3‑5份、弗氏不完全佐剂3‑5份、碳二亚胺3‑5份、戊二醛1‑2份、羊抗鼠酶标二抗1‑3份、磷酸氢二钠2‑3份、醋酸钠8‑10份、十二烷基磺酸钠15‑20份、考马斯亮蓝R‑250 10‑15份、过氧化脲8‑12份、乙醇6‑11份、甲醛5‑7份、磷酸盐缓冲液5‑7毫升、洗涤液PBST 0.5升、封闭液5％猪血清0.25升，以硫酸卡那霉素和牛血清白蛋为主要原料，采用偶联方法制备出可以与酶标抗原竞争结合包被的抗体，整个反应过程具有简单、高效、经济、可操作性强等特点。

技术领域

本发明涉及卡那霉素抗体制备工艺领域，具体涉及一种中药饮片卡那霉素抗体的配方及制备工艺。

背景技术

近年来，随着抗生素等兽药添加剂在农牧业领域里的应用不断扩张，抗生素污染问题、兽药残留问题已日益严重。抗生素等兽药半衰期长、自然条件下很难被分解，对环境危害巨大。如果不加控制的作为动物食品添加剂，抗生素在动物源性食品中会形成一定的残留，如果人类长期服用此类含有抗生素残留的食品，将对健康造成严重威胁。

细菌的耐药性指的是细菌与某种药物多次接触后，对该药物的敏感性下降甚至对其敏感性消失的现象。如果细菌长期接触这些残留的低浓度药物，就会使其产生一定的耐药性，而且细菌的耐药性可以通过动物群中的细菌、人群中的细菌与生态系统中的细菌互相传递，可能会达到无法操控的规模。细菌耐药性这一现象的危害不容忽视，它不仅能使得抗生素的疗效在一定程度上减弱或失效；更严峻的是，由于其疗效减弱，导致生产者增加投药剂量，势必造成药物残留量的增加，由此形成一个恶性循环，加重耐药菌的普遍化。由此将导致严峻的人类环境问题及公共卫生问题。

氨基糖苷类抗生素能有效抑制细菌生长，它主要作用于细菌体内的核糖体30s亚基发生集聚反应，从而抑制细菌体内蛋白质的合成、阻碍已合成蛋白的释放。具体过程为：氨基糖苷类抗生素通过细胞外膜的孔蛋白，然后经Ⅰ期转运系统摄入细胞内，此过程为能量依赖过程，受钙离子、镁离子等离子及高渗、低氧和酸碱性等因素的影响，可被此类因素阻断。当氨基糖苷类抗生素与细胞核糖体的30S亚基发生积聚时，可引起Ⅱ期转运系统参与，此过程可导致大量氨基糖苷类抗生素在细胞内迅速积聚，阻断正常的肽链延长过程，造成遗传密码mRNA的错误解读，从而阻碍正常蛋白质的合成。这些非正常蛋白质进入细菌细胞膜，可引起细胞膜断裂，致使胞内的核苷酸、钾离子、腺嘌呤等参与生命活动的重要物质外漏，从而直接导致细菌死亡。氨基糖苷类抗生素对革兰氏阴性细菌的抑制效果良好，但对革兰氏阳性细菌的抑制效果较差。

发明内容

针对以上问题，本发明提供了一种中药饮片卡那霉素抗体的配方及制备工艺，利用分子的官能团等功能基团，并添加一些偶联试剂，产生一定的化学反应从而实现半抗原与载体分子偶联，可以有效解决背景技术中的问题。

为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：一种中药饮片卡那霉素抗体的配方及制备工艺，按照重量份数由如下原料组成：

硫酸卡那霉素58-80份、牛血清白蛋白5-25份、卵清白蛋白3-5份、弗氏完全佐剂3-5份、弗氏不完全佐剂3-5份、碳二亚胺3-5份、戊二醛1-2份、羊抗鼠酶标二抗1-3份、磷酸氢二钠2-3份、醋酸钠8-10份、十二烷基磺酸钠15-20份、考马斯亮蓝R-25010-15份、过氧化脲8-12份、乙醇6-11份、甲醛5-7份、硼氢化钠8-13份、甲醇1-3份、浓硫酸1-3份、磷酸盐缓冲液5-7毫升、包被用碳酸盐缓冲液CBS 0.5升、洗涤液PBST 0.5升、封闭液5％猪血清0.25升，ELISA试验显色液0.5升、ELISA试验终止液1升。