[发明专利]一种从甘草中分离纯化醇溶性总黄酮的方法

说明书

本案涉及一种从甘草中分离纯化醇溶性总黄酮的方法，以甘草为原料，首先通过低碳醇提取、浓缩、干燥制得粗提物，然后用碱水浸提粗提物，过滤，水洗沉淀至中性后干燥，得到醇溶性黄酮，其中黄酮的含量＞50％；用本案中方法制得的醇溶性黄酮的含量高、制备工艺过程简单、转移率高、醇溶性好、成本低、适合规模化工业生产，应用前景广阔。

技术领域

本发明涉及植物中有效成分的分离纯化，具体涉及一种从甘草中分离纯化醇溶性总黄酮的方法。

背景技术

甘草是一种多年生草本植物，含有黄酮类、三萜类、多糖类等多种功效成分，因此甘草也是一味在世界范围内被广泛应用的中药。从甘草中分离得到的甘草黄酮因为具有抑菌、抗病毒、抗肿瘤、抗氧化、保肝等出色的药理作用，被广泛应用于抗消化性溃疡、抗心血管疾病及抗炎、抗病毒等药物和保健品中，目前从各种甘草中分离得到的黄酮类化合物达100多种。

甘草黄酮是甘草中一大类活性物质的总称，它由许多不同成分组成，而且每种成分的药理作用又各不相同，因此对甘草黄酮的分离纯化尤为重要。传统的甘草黄酮分离方法工艺复杂、收率低、成本高，而且对甘草有效成分的综合利用率低。近年来，人们针对甘草酸的分离纯化工艺开展了许多研究，也取得了一些成果，但是对甘草中黄酮类物质的提取工艺研究较少，对醇溶性甘草黄酮的分离纯化研究更少。已报道的醇溶性甘草黄酮的分离纯化方法包括聚酰胺分离法、溶剂浸泡法、超临界萃取法及大孔树脂分离法，这些方法大都存在着工艺复杂、处理量小、甘草综合利用率低、设备要求高、提取温度高、提取时间长、溶剂处理麻烦、收率低等缺点。

下边列举了与醇溶性黄酮分离纯化方法直接相关的授权发明专利或申请专利：

(1)中国专利(申请号：201510479850.9)“一种甘草总黄酮提取纯化工艺”，该发明公开了一种甘草总黄酮提取纯化工艺，包括如下步骤：甘草提取液的制备：取甘草黄酮提取物0.10g，精密称定，至100mL容量瓶中，加甲醇80mL，超声处理90min，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，滤过即得；甘草总黄酮提取：取甘草饮片，用6倍量的95％乙醇回流提取2次，1.5h一次，过滤，回收乙醇至含药材1g/mL；预处理聚酰胺：称取聚酰胺细粉60—100目，用5倍量乙醇回流2次，1h/次，湿法装柱，用2BV95％乙醇过柱，再用水洗至无醇味；确定甘草中药材与聚酰胺的上样比；确定径高比；选择洗脱剂。该方法使用聚酰胺分离黄酮，聚酰胺柱处理麻烦、效率低、处理量小等缺点。

(2)日本专利(JP2004292385A)报道，甘草首先在中性或碱性条件下浸取，然后酸沉淀得粗甘草酸；用乙醇萃取粗甘草酸沉淀，并用活性碳对乙醇提取液脱色，调pH至5-5.5使甘草酸结晶，过滤得甘草酸和滤液；滤液调pH至7，减压蒸发并干燥得黄褐色粉末，粉末含甘草酸11％，黄酮15％。这种方法得到的制品甘草黄酮含量太低，在沉淀甘草酸的过程中，部分甘草酸没有沉淀下来。

(3)中国专利(CN1207910A)“甘草总黄酮提取方法”，该发明涉及甘草总黄酮提取方法，该方法以甘草或甘草粗提取物为原料，经稀氨水提取，酸化沉淀，醇提取、氨化去甜素，回收乙醇后浓缩物溶于水，调pH值，用大孔吸附树脂吸附，经水洗后，用稀氨水或氨改性稀乙醇液洗脱总黄酮粗品，经中和、浓缩、酸析、水洗、脱水，用有机溶剂提取，回收溶剂，干燥后即得甘草总黄酮。这种方法的不足在于步骤太多。

(4)中国专利(CN1450063A)“超临界二氧化碳萃取甘草黄酮的方法”，该发明主要工艺过程是：甘草根茎烘干→粉碎→超临界二氧化碳萃取→一级减压分离→二级减压分离→甘草黄酮提取液。这种方法虽具有萃取温度低、速度快、萃取率高、对人和环境无不良影响等特点；但操作压力太高，对设备要求高，难于工业化。

(5)中国专利(CN1477104A)“甘草黄酮的提取纯化方法”，该发明涉及一种甘草黄酮的提取纯化方法，本发明改进了国内外文献所叙述的以溶剂萃取后相分配及以大孔树脂吸附杂质等制备得甘草黄酮的方法，代之以使用膜技术或层析进行纯化得甘草黄酮或再进行层析纯化。这种方法采用超滤膜过滤，操作压力高，对设备要求高，且后期还需层析分离纯化，有机溶剂用量大，处理量小，效率低。