[发明专利]一种固相合成Etelcalcetide的方法

权利要求书

1.一种固相合成Etelcalcetide的方法，其特征在于，包括：

步骤1、固相合成在SEQ ID NO:1所示氨基酸序列D-Arg侧链上偶联有保护基，且在SEQID NO:1所示氨基酸序列C端偶联有氨基树脂的肽树脂；

步骤2、步骤1所述肽树脂N端与Ac-D-Cys[R1-Cys-OR2)]的C端偶联，获得Etelcalcetide树脂；其中，所述R1为Boc或Fmoc，R2为All或tBu；

步骤3、所述Etelcalcetide树脂经由TFA、EDT和水组成的混合酸解液酸解，获得Etelcalcetide粗品；

步骤4、所述Etelcalcetide粗品纯化后获得纯品。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤3所述混合酸解液由体积百分比为80-95％的TFA、1-10％的EDT，余量为水组成。

3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，步骤1为：

保护氨基酸Fmoc-D-Arg(Pbf)-OH与氨基树脂偶联，然后依次将保护氨基酸Fmoc-D-Ala-OH、Fmoc-D-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-D-Arg(Pbf)-OH、Fmoc-D-Arg(Pbf)-OH和Fmoc-D-Ala-OH按照SEQ ID NO:1所示氨基酸序列的C端至N端顺序逐一偶联，获得所述肽树脂。

4.根据权利要求3所述方法，其特征在于，所述氨基树脂为Rink MBHA树脂、Rink Amide树脂或Rink Amide AM树脂。

5.根据权利要求1或3所述方法，其特征在于，所述偶联采用缩合试剂和活化试剂进行偶联。

6.根据权利要求5所述方法，其特征在于，所述缩合试剂为N,N-二异丙基碳二亚胺、N,N-二环己基碳二亚胺，六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷/有机碱、2-(7-氮杂-1H-苯并三氮唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸酯/有机碱、苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐/有机碱、O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸酯/有机碱中的一种；其中，六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷/有机碱、2-(7-氮杂-1H-苯并三氮唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸酯/有机碱、苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸盐/有机碱、O-苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟硼酸酯/有机碱属于四种双体系的缩合试剂，PyBOP、HATU、HBTU、TBTU在使用时需要分别和有机碱组合在一起成为一种缩合试剂使用。

7.根据权利要求6所述方法，其特征在于，所述有机碱为N,N-二异丙基乙胺、三乙胺或N-甲基吗啡啉。

8.根据权利要求5所述方法，其特征在于，所述活化试剂为1-羟基苯并三唑或N-羟基-7-氮杂苯并三氮唑。