[发明专利]一种酸枣仁抗肿瘤结合态多酚及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种酸枣仁抗肿瘤结合态多酚及其制备方法和应用。本发明通过改进传统的酸水解工艺，将酸枣仁粉碎并提取游离态多酚后的酸枣仁残渣，加入适量的酸水解液，均匀搅拌酸性提取液，消化适当时间后，调节pH至中性，离心，收集上清液，加入乙酸乙酯萃取数次，离心，收集水相液，并进行旋转蒸发和真空冷冻干燥，即制得酸枣仁中的水溶液结合态多酚，命名为：ZSSBP。该方法工艺简单，耗时短，获得的结合态多酚抗肿瘤活性显著，得率高，方便大规模生产。

技术领域

本发明涉及植物多酚的制备和应用，具体属于一种酸枣仁水溶性结合态多酚及其制备方法，以及该结合态多酚在抗肿瘤药物、特殊医药食品及保健食品中的应用。

背景技术

酸枣仁(学名：Ziziphus jujuba Mill.var.spinosa)，英文：Zizyphi SpinosiSemen是鼠李科植物酸枣的干燥成熟种子，是使用历史悠久的传统中药，我国分布较广，朝鲜俄罗斯也有分布。作为药用，中医将其列为养心安神药类，功用以补肝、宁心、敛汗、生津为主，用于虚烦不眠，惊悸多梦，体虚多汗等，被中国药典2000年版收载，在临床用药和多种保健品中，酸枣仁是镇静安神药的主要成分。研究发现：酸枣仁中含有多种活性成分，如酸枣仁皂苷、萜类化合物白桦脂酸及其衍生物，对中枢神经系统、心血管、降血脂、抗肿瘤及提高免疫力等有显著功效。

植物多酚类物质主要以自由态和结合态多酚两种形式存在。有研究表明，植物中的许多结合态多酚化合物具有抗氧化、抑菌、消炎、降血脂、降血糖、抗肿瘤、增强免疫力功能。不同种类的植物多酚其组分差异较大，其制备工艺也各不相同，因此，针对不同的材料，需要优化改进确定其合适的多酚提取方法。目前对于酸枣仁多酚，尤其是对于结合态多酚的制备工艺尚未见报道，本实验以北方地区酸枣仁为材料，通过优化制备工艺获得一种水溶性结合态多酚，该多酚能够显著抑制多种肿瘤细胞的增殖，尤其能够逆转肿瘤的多药耐药性，因此，本发明为酸枣仁这一传统中药赋予了新的开发和利用价值，同时也将应用于抗肿瘤药物、特殊医药食品及保健品制剂的开发。

发明内容

本发明的目的在于提供一种酸枣仁水溶性结合态多酚及其制备方法，以及该多酚在制备抗肿瘤药物、特殊医药食品及保健食品中的应用。该制备方法工艺简单，得率高，耗时短，方便大规模生产。该结合态多酚抗肿瘤活性显著。

本发明的上述目的是通过以下技术方案实现的：

一种酸枣仁水溶性结合态多酚(ZSSBP)的制备方法，包括如下步骤：

第一步：按体积比1:9取浓硫酸和甲醇配制成酸水解液，酸水解液中硫酸的浓度为1.84mol/L；

第二步：酸枣仁粉碎后，加入预冷的丙酮，4℃下均匀搅拌30-40min，离心，去上清液，残渣重复提取1-2次，留残渣；

所述丙酮的浓度优选为80％；所述的酸枣仁和丙酮重量体积比(W/V)优选为1g︰15-20mL；离心时，离心速度优选为5000rpm，温度优选为4℃，离心时间优选为10min；

第三步：将收集的残渣中加入按第一步配置的酸水解液，用摇床充分孵育消化，然后加入适量10mol/L NaOH溶液使消化溶液pH至中性终止消化；

所述的酸枣仁残渣和酸水解液重量体积比(W/V)优选为1g︰10-15mL；所述消化温度优选为37℃，消化时间优选为1.5-2h；

第四步：终止消化后，离心，弃沉淀，在上清液中加入等体积的乙酸乙酯重复萃取2-3次，离心，取下层水相，得结合态多酚提取液；

所述的离心时，离心速度优选为11,000rpm，温度优选为4℃，离心时间优选为10min；

第五步：将上述获得的结合态多酚提取液在45℃下旋转蒸发，除净有机溶剂，真空冷冻干燥成粉末即得结合态多酚样品，于4℃保存。