[发明专利]磁柔性载体CMC/DHBH-Fe3O4的制备方法及其应用

权利要求书

1.磁柔性载体CMC/DHBH-Fe₃O₄的制备方法，其特征是包括以下步骤：

1)、制备羧甲基壳聚糖席夫碱产物：

1.1)、将羧甲基壳聚糖加入无水乙醇，于40～60℃下溶胀浸泡12h，得已溶胀的羧甲基壳聚糖溶液；

室温下，在3,4-二羟基苯甲醛中加入DMF直至3,4-二羟基苯甲醛完全溶解，之后下加入至已溶胀的羧甲基壳聚糖溶液中；

所述羧甲基壳聚糖与3,4-二羟基苯甲醛的质量比为1:1～4；

1.2)、将步骤1.1)所得的混合溶液于40～60℃下进行超声振荡搅拌4～8h；将超声震荡后的产物进行洗涤、过滤及干燥，得到羧甲基壳聚糖席夫碱产物，记为CMC/DHBH；

2)、羧甲基壳聚糖席夫碱还原产物对磁纳米粒子的包裹：

2.1)、将羧甲基壳聚糖席夫碱产物与氰基硼氢化钠还原，得羧甲基壳聚糖席夫碱还原产物；所述羧甲基壳聚糖席夫碱产物与氰基硼氢化钠的质量比为1：0.9～1.1；

2.2)、将Fe₃O₄纳米粒子加入至Tris-HCl溶液中，超声分散30～90min；

2.3)、将步骤2.2)所得的超声分散均匀的溶液加入至步骤2.1)所得物中，室温下搅拌10～14h后进行磁分离；

将磁分离所得物经洗涤，干燥，获得磁柔性载体CMC/DHBH-Fe₃O₄；

步骤2.1)中的CMC/DHBH与所述步骤2.2)中的Fe₃O₄与的质量比1.8～2.1:1。

2.根据权利要求1所述的磁柔性载体CMC/DHBH-Fe₃O₄的制备方法，其特征是，所述步骤2.1)为：

将羧甲基壳聚糖席夫碱产物溶于水中，加入氰基硼氢化钠使其搅拌均匀，反应4-8h；

羧甲基壳聚糖席夫碱产物与水的用量比为100mg/50±10ml，

氰基硼氢化钠与羧甲基壳聚糖席夫碱产物的用量比为1:1。

3.根据权利要求1或2所述的磁柔性载体CMC/DHBH-Fe₃O₄的制备方法，其特征是，

所述步骤1.1)中，羧甲基壳聚糖与无水乙醇的用量比为100mg/20±2ml，3,4-二羟基苯甲醛与DMF的用量比为200mg/20±2mL；

所述步骤2.2)中，Fe₃O₄纳米粒子与Tris-HCl溶液的用量比为50mg/50±5ml。

4.根据权利要求3所述的磁柔性载体CMC/DHBH-Fe₃O₄的制备方法，其特征是：

所述步骤1.1)中，羧甲基壳聚糖与3,4-二羟基苯甲醛的质量比为1:2；

所述步骤1.2)中，将步骤1.1)所得的混合溶液于55℃下进行超声振荡搅拌8h。

5.根据权利要求4所述的磁柔性载体CMC/DHBH-Fe₃O₄的制备方法，其特征是：

所述步骤2.3)中，CMC/DHBH与Fe₃O₄与的质量比2:1。

6.根据权利要求5所述的磁柔性载体CMC/DHBH-Fe₃O₄的制备方法，其特征是：

所述步骤2.2)中，超声分散时长为60min。

7.如权利要求1～6任一方法制备而得的磁柔性载体CMC/DHBH-Fe₃O₄的用途，其特征是：用于固定化酶。

8.根据权利要求7所述的磁柔性载体CMC/DHBH-Fe₃O₄的用途，其特征是：

于pH＝8的体系条件下，将10mg的CMC/DHBH-Fe₃O₄与1.8～2.2mg的脂肪酶于38～42℃进行固定化反应6小时。