[发明专利]一种安丝菌素P-3的提取与分离纯化方法

权利要求书

1.一种安丝菌素P-3的提取与分离纯化方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：

1)将发酵结束的发酵液或固体发酵培养基用萃取溶剂进行萃取，得到萃取液；

2)将步骤1)得到的萃取液集中浓缩至无萃取溶剂流出得到浓缩浸膏粗品A，然后加入中性氧化铝，并加入有机溶剂使其与粗品A混合均匀；

3)将步骤2)混合均匀的粗品A旋蒸至干燥的沙状；

4)将有机溶剂加入步骤3)干燥的沙状粗品A中，震荡静置，取上清液；

5)将步骤4)的上清液集中浓缩，加入硅胶旋蒸至沙状，用柱层析法梯度洗脱得到安丝菌素P-3。

2.根据权利要求1所述的安丝菌素P-3的提取与分离纯化方法，其特征在于：步骤1)中所述的萃取溶剂为乙酸乙酯、二氯甲烷、乙腈或乙酸丁酯中的一种。

3.根据权利要求1所述的安丝菌素P-3的提取与分离纯化方法，其特征在于：步骤2)中所述的中性氧化铝的加入量为浓缩浸膏质量的1.2-1.5倍，加入的有机溶剂为乙酸乙酯、二氯甲烷、乙腈、乙酸丁酯中的一种或几种的混合物。

4.根据权利要求1所述的安丝菌素P-3的提取与分离纯化方法，其特征在于：步骤2)、步骤3)、步骤5)中所述的浓缩或旋蒸为减压旋转蒸发，旋转蒸发过程中的水浴温度为35-45℃。

5.根据权利要求1所述的安丝菌素P-3的提取与分离纯化方法，其特征在于：步骤4)中所述的有机溶剂为乙酸乙酯、甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷、乙酸丁酯中的一种或几种的混合物，其中，每克沙状粗品A使用5-20mL有机溶剂。

6.根据权利要求1所述的安丝菌素P-3的提取与分离纯化方法，其特征在于：步骤5)中所述的硅胶的加入量是浓缩粗品A质量的1.2-1.5倍，柱层析的固定相的量是粗品A与硅胶质量和的5-10倍，湿法装柱，干法上样，按照石油醚-乙酸乙酯体积比10:1,5:1,3:1,2:1,1:1,1:2进行梯度洗脱，薄层层析法追踪筛选，收集含有安丝菌素P-3的洗脱液并集中旋蒸。

7.根据权利要求1所述的安丝菌素P-3的提取与分离纯化方法，其特征在于：所述方法还包括步骤6)：将步骤5)得到的安丝菌素P-3浓缩物重结晶。

8.根据权利要求7所述的安丝菌素P-3的提取与分离纯化方法，其特征在于：所述步骤6)重复操作一次或多次。