[发明专利]生物标志物在骨肉瘤诊治中的应用

说明书

本发明公开了生物标志物在骨肉瘤诊治中的应用，所述生物标志物为PNPLA5。本发明通过高通量测序发现PNPLA5在骨肉瘤患者中表达上调，进一步研究发现，干扰PNPLA5的表达，可以降低骨肉瘤细胞的增殖率，提示PNPLA5可作为分子指标应用于骨肉瘤的临床诊断和治疗。

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及生物标志物在骨肉瘤诊治中的应用，具体的生物标志为PNPLA5。

背景技术

骨肉瘤是最常见的原发性恶性骨肿瘤，是来源于胚胎间叶组织的恶性程度很高的实体性肿瘤。大多数骨肉瘤为原发性肿瘤，只有少部分为继发性，好发部位位于血运丰富的四肢骨的干骺端，以下肢股骨远端和胫骨近端最常见，其次是胧骨和腓骨近端。骨肉瘤多为溶骨性改变，少数为成骨性改变，骨肉瘤组织中含有不同成分的骨软骨、纤维结缔组织及增生骨样骨组织。骨肉瘤病理学特点是肿瘤组织能产生高度恶性梭形基质细胞，并形成骨样组织，肿瘤细胞还可以直接成骨和产生骨基质，可浸润扩散至骨皮质及髓腔。目前也有新的研究表明，骨肉瘤的恶性肿瘤细胞并非完全来自于骨基质细胞，骨间质的多能干细胞恶性增殖也能导致骨肉瘤的发生。

骨肉瘤发病率在原发性恶性骨肿瘤中占据首位，骨肉瘤发病年龄多在15～25岁，发病率为4.5/100万，在美国每年新发的骨肉瘤患者约为900例。骨肉瘤多早期远处转移，而且发展迅速，其转移率及病死率非常高。单纯行截肢治疗或行保肢手术及肿瘤型假体置换手术无法有效控制肿瘤的转移，患者常在短期内死于肿瘤肺转移，如何治疗骨肉瘤肺转移成为骨肉瘤治疗中面临最重要问题之一。随着治疗手段的不断提高，目前采用新辅助化疗加保肢手术等综合性治疗已经成为治疗骨肉瘤的主要方式，可有效提高患者的短期生存率，对骨肉瘤的治疗已经取得了明显进步。随着手术及新辅助化疗等技术的快速发展，未发生转移的骨肉瘤患者5年生存率提高到70％左右，但对骨肉瘤转移及复发等问题仍然没有得到有效解决，伴有肺部转移的骨肉瘤患者短期生存率没有明显提高。

越来越多的治疗开始向分子遗传学和分子生物学方面靠近，从基因及干细胞角度去尝试治疗肿瘤病变是将来医学的发展方向。目前肿瘤的治疗包括介入治疗、免疫治疗、干细胞移植等多种手段，为恶性肿瘤的治疗提供了可靠而安全的治疗，而基因在骨肉瘤中的作用也越发受到重视，如专利CN 201510075917.2、CN 201510075920.4、CN201510075918.7、CN201510075919.1中就公开了WWP1、PNPLA5、CCTγ、PLEKHA5与骨肉瘤的发生发展相关。尽管骨肉瘤的研究取得了长足的进步，但是迄今为止报道的骨肉瘤的生物标志物仍然较少，且尚未有效的生物标志物应用于骨肉瘤的临床诊断和治疗。因此寻找新的有效的生物标志物，对于骨肉瘤的早期诊断以及靶向治疗具有重要的意义。

发明内容

本发明的目的之一在于提供一诊断标志物，该诊断标志物为PNPLA5。

本发明的目的之二，提供一种产品，能够实现骨肉瘤的早期诊断，提高骨肉瘤患者的生存率和生活质量。

本发明的目的之三，提供一种治疗靶标，实现骨肉瘤患者的个性化治疗。

本发明的目的之四，提供一种筛选预防和治疗骨肉瘤的药物的手段，当被筛选药物能有效的降低生物标志物的表达水平时，说明该药物为潜在的候选药物。

为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

本发明提供了检测PNPLA5表达水平的试剂在制备诊断骨肉瘤的产品中的应用。其中，PNPLA5在骨肉瘤患者中表达上调。

进一步，所述试剂包括通过使用qRT-PCR、印记杂交、原位杂交、阵列杂交、基因芯片或新一代测序来检测PNPLA5表达水平的试剂。

进一步，所述试剂选自：

特异性识别PNPLA5基因的探针；或

特异性扩增PNPLA5基因的引物；或