[发明专利]一种检测结核抗体的多重液相芯片在审
| 申请号： | 201810030875.4 | 申请日： | 2018-01-12 |
| 公开（公告）号： | CN108241052A | 公开（公告）日： | 2018-07-03 |
| 发明（设计）人： | 闫冀焕;史玲莉;杨烨;梁少军;李云;田洁;慈颖;刘春晓;廉国胜;黄恩炯;王胜启;沈军;张苗;石顺利;兰景;李薇;付晓昀 | 申请（专利权）人： | 河北国际旅行卫生保健中心 |
| 主分类号： | G01N33/533 | 分类号： | G01N33/533;G01N33/558;G01N33/543 |
| 代理公司： | 长沙星耀专利事务所(普通合伙) 43205 | 代理人： | 许伯严 |
| 地址： | 050091 河北*** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 抗原 生物素化抗体 编码微球 多重检测 结核抗体 液相芯片 种检测 生物素标记 体系稳定性 多重体系 检测结果 融合蛋白 荧光微球 种试剂盒 抗人IgG 灵敏度 结核病 兔抗鸡 阳性率 鸡IgG 羧基 山羊 检测 | ||
1.一种检测结核抗体的多重液相芯片，其特征在于，包括抗原藕联编码微球和生物素化抗体，所述抗原藕联编码微球为将LAM、CFP-10、EAST-6、16KD、38KD、65KD和TBGL抗原、CFP10-EAST6和38KD-16KD融合蛋白、鸡IgG、Biotin-BSA、BSA、SA-PE分别偶联在不同编码的荧光微球上；所述生物素化抗体为用羧基活性的生物素标记兔抗鸡IgG和山羊抗人IgG。
2.如权利要求1所述的检测结核抗体的多重液相芯片，其特征在于，所述荧光微球在偶联前采用EDC和S-NHS进行活化。
3.如权利要求1所述的检测结核抗体的多重液相芯片，其特征在于，生物素化抗体的制备方法为：
(1)取出待标记的生物素，平衡至室温；
(2)称取生物素1mg，溶于200μL超纯水，配制成5mg/mL的1液；
(3)根据生物素试剂盒推荐的所需蛋白量，每2mg蛋白需加5mg/mL的生物素溶液27μL，4℃放置2h；
(4)标记生物素的抗原溶液过脱盐柱，收集蛋白，用夹心ELISA验证生物素标记效果；
(5)将标记好的生物素化抗原，分装-70℃保存备用。
4.如权利要求1-3任一项所述的检测结核抗体的多重液相芯片，其特征在于，采用该多重液相芯片检测时判断的方法为：当每种荧光编码微球个数不少于35个，空白对照荧光强度不高于300时，表明试验成立，可进行结果判定；若MFI样品孔/MFI空白对照≥3，则检测结果判为阳性；若2≤MFI样品孔/MFI空白对照<3，则检测结果待定，需重复实验；若MFI样品孔/MFI空白对照<2，则检测结果判定为阴性。
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