[发明专利]一株产壳聚糖酶的枯草芽孢杆菌及其应用

说明书

本发明属于生物技术领域，具体涉及一株产壳聚糖酶枯草芽孢杆菌及其应用。本发明提供的枯草芽孢杆菌，其所产的壳聚糖酶产量高、酶活力强，具有与普通壳聚糖酶不同的蛋白结构，为壳聚糖酶分子机构的深入研究提供了新思路。普通的壳聚糖酶只在弱碱性至弱酸性时具有较好的活性，而本发明发现的壳聚糖酶在弱碱性、中性、弱酸性和较强酸性条件下均具有较好活性。同时，本发明发现的壳聚糖酶，不仅可作用于能够溶解的壳聚糖，还可作用于不可溶的高聚壳聚糖，省略了壳聚糖降解前的处理；反应终产物为二聚氨基葡萄糖和三聚氨基葡萄糖，成分简单，便于后续进一步加工应用，极大地节省了生产成本。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一株产壳聚糖酶的枯草芽孢杆菌及其应用。

背景技术

氨基葡萄糖是重要的医药前体和化工原料,具有广泛的用途。虾蟹壳来源的壳聚糖(Chitosan)是由D-氨基葡萄糖(或少量N-乙酰-D-氨基葡萄糖)通过β-1,4-糖苷键连接形成的聚合物,全球每年产生的壳聚糖超过1000亿吨,通过水解壳聚糖可以生产大量的氨基葡萄糖。

目前，常用的壳聚糖水解方法分别有：酸法水解、氧化降解、物理降解法和酶法水解。其中酶法降解壳聚糖具有环境污染低、反应条件温和、无副产物等优点，是目前应用前景最广的壳聚糖降解方法，近年来已经逐渐用于工业化生产，而酶法水解壳聚糖的关键在于壳聚糖酶。

尽管酶法制备壳寡糖存在许多优势，但现有的壳聚糖酶普遍存在：适用的pH范围狭窄、只能作用于可溶解壳聚糖、降解产物多为五糖(G5)至以上的寡糖等问题。如一篇名为“微生物壳聚糖酶的研究概况”的报道中提出：现有的各类壳聚糖酶，多数为碱性蛋白，最适pH普遍集中在5～8之间，偶有几个酶的最适pH为4，但其对应的最适温度偏高，造成在实际生产应用中能耗较高、适用范围不广的情况。

因此，开发一种适宜pH范围广、最适温度相对偏低、可将不可溶壳聚糖降解为二糖(G2)、三糖(G3)等低聚糖的壳聚糖酶，可有效推动海洋虾蟹来源壳聚糖的深度利用，具有重要的现实意义。

发明内容

本发明的目的是提供一株产壳聚糖酶的枯草芽孢杆菌及其应用。

为实现上述发明目的，本发明所采用的技术方案是：一株枯草芽孢杆菌，2017年10月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,菌种名称:枯草芽孢杆菌，Bacillus subtilis，MY002，保藏编号为CGMCC No.14841。

相应的，一株枯草芽孢杆菌，其16SrDNA测序结果如SEQ ID NO 1所示；其gyrA测序结果如测序结果如SEQ ID NO 2所示；其gyrB测序结果如SEQ ID NO 3所示。

相应的，所述枯草芽孢杆菌在水解壳聚糖中的应用。

优选的，所述应用的pH范围为2.5～7.5。

优选的，所述应用的pH为：3或6。

优选的，所述应用的温度范围为35～65℃。

相应的，一种壳聚糖酶CsnMY002，其特征在于：其核苷酸序列如SEQ ID NO 4所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO 5所示。

相应的，所述壳聚糖酶CsnMY002在水解壳聚糖中的应用。

优选的，所述应用的pH范围为：2.5～7.5。

优选的，所述应用的温度为35～65℃。

本发明具有以下有益效果：

1、本发明提供了一株产壳聚糖酶的枯草芽孢杆菌，其所产的壳聚糖酶具有产量高、酶活力强等优点。