[发明专利]一株具有降解4-氨基喹啉功能的微杆菌

说明书

本发明公开了属于生物降解处理技术领域的一株对4‑氨基喹啉具有降解功能的菌株。4‑氨基喹啉降解菌经鉴定为微杆菌Microbacterium sp.M.CWS5，菌种保藏号为CGMCC No.14840。将该菌株制成含菌量为1.25×10⁸CFU/ml的菌悬液，对初始浓度为4.86mg/L的4‑氨基喹啉在5天后的降解去除率为94.3％。

技术领域

本发明属于受污染土壤与水的生物降解处理技术领域，特别涉及一株具有降解4-氨基喹啉功能的微杆菌。

背景技术

喹啉为典型的含氮杂环芳香烃化合物，属于石化废水中常见的污染物，具有较强的毒性，对生物体具有一定的致畸、致癌、致突变作用，对人体以及动植物体有着较大的潜在危害，能够通过食物链在包括人类的较高级生物体中进行积累，含喹啉污染物的大量排放对人类的健康以及自然环境会造成严重的威胁。目前喹啉的应用越来越广泛，用量不断增加，在环境中持久性的存在并不断扩散，已成为土壤环境和水环境中的常见污染物。在常规生物处理系统中难以达到良好的降解去除效果，为了降解废水中的喹啉，避免喹啉对自然环境和人类健康的影响，国内外研究者开展了大量研究工作，寻找喹啉处理的有效途径。对环境中喹啉的治理技术主要有物理法、化学法和生物法，其中生物法具有操作简单、运行费用低、无二次污染等优点。然而由于缺少高效的喹啉降解菌，制约了喹啉污染土壤生物修复技术的进一步发展和应用。因此，需要从污染的环境中驯化筛选出对喹啉降解速率较快的微生物菌种，然后再把它们应用于实际喹啉污染环境的生物治理，这对于治理和修复喹啉污染土壤有重要的意义。

发明内容

本发明提供一株具有降解4-氨基喹啉功能的微杆菌。所用菌株经鉴定为微杆菌Microbacterium sp.M.CWS5,2017年10月30日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，该中心位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，菌种保藏号为CGMCC No.14840。将该菌株制成含菌量为1.25×10⁸CFU/mL的菌悬液，可用于环境中4-氨基喹啉的降解。

从污染土壤中分离纯化所述4-氨基喹啉降解菌的步骤如下：

(1)选取受喹啉污染的土壤，将其通过直径为2mm的网筛后立即放置于4℃冰箱中保存备用；

(2)向体积为1000mL的开口玻璃瓶中加入45mL浓度为0.8g/L的4-氨基喹啉的丙酮混合溶液，为除去丙酮将玻璃瓶开口放置2天；

(3)向由步骤(2)得到的开口玻璃瓶中加入500～600mL基础培养基，在转速为100r/min的条件下搅拌40～50min后加入由步骤(1)得到的土壤200g；然后置于温度为25～30℃的环境中在转速为100r/min的条件下搅拌富集驯化培养65d，在培养期间定期向玻璃瓶中加入基础培养基以维持玻璃瓶中泥浆系统的水土比例保持不变；其中基础培养基的组成为：NH₄Cl:1.5g·L^-1，KH₂PO₄:1.5g·L^-1，MgCl₂:0.25g·L^-1，CaCl₂·2H₂O:0.10g·L^-1；

(4)分别向7个体积为250mL的锥形瓶中加入10mL质量浓度为0.8g/L的4-氨基喹啉的丙酮混合溶液，在通风橱中放置2天后得到锥形瓶1、锥形瓶2、锥形瓶3、锥形瓶4、锥形瓶5、锥形瓶6、锥形瓶7；