[发明专利]嘌呤检测方法

说明书

本发明涉及食品检测方法，特别是涉及嘌呤检测方法，包括如下步骤：将待检测样品进行预处理；利用液相色谱分析仪对预处理后的待检测样品进行分析，其中，液相色谱分析仪的流动相包括甲酸铵溶液和甲醇；甲酸铵溶液为0.3～0.4g甲酸铵溶于500ml超纯水中制成，甲酸铵溶液的pH值为3.5～3.59；甲酸铵溶液与甲醇的比例(按体积计)为：97～99:3～1；液相色谱分析仪的流速为0.8～1.2mL/min。利用该方法检测，使得四种嘌呤的分离效果好且保留时间与标准品的保留时间对应。并且本发明的嘌呤检测方法的预留时间在11min～17min之间，大大缩减了预留时间，不仅提高了检测效率，而且大大降低了检测成本。

技术领域

本发明涉及食物检测方法，特别是涉及嘌呤检测方法。

背景技术

食物中嘌呤主要分为四种：鸟嘌呤、腺嘌呤、次黄嘌呤和黄嘌呤，分别对食物中这四种嘌呤物质进行含量检测，结果相加即为食物的嘌呤含量。现对嘌呤进行检测的主流方法为高效液相色谱法(HPLC)，高效液相色谱仪主要分为几个部分：存放流动相的贮液器以及脱去流动相中的气体以保护色谱仪的脱气装置(输液系统)、将食物样品及流动相通过高压泵的作用进入色谱柱的进样装置(进样系统)、色谱过程中携带待测食物样品向前移动的流动相和实现食物样品中四种嘌呤分离的固定相——色谱柱(分离系统)，检测到样品分离并将其转换成图像信号(峰信号)的检测器(检测系统)以及计算峰信号面积的数据处理系统。简单来说，食物样品及流动相通过进样系统运送到色谱柱(固定相)，在色谱柱(固定相)内流动相携带食物样品向前移动，食物样品中的成分因质量、结构等不同在色谱柱(固定相)中的吸附时间不同，因此离开色谱柱的时间也不同(保留时间)。当某种成分离开色谱柱时即被检测器感受，并在显示屏以峰的形式显示出来，通过数据处理系统可得知峰面积的大小，而峰面积的大小与成分的含量成正比。

现有技术虽然能四种嘌呤基线分离，但鸟嘌呤和腺嘌呤标准品峰仅能基线分离，并且在实际食品嘌呤检测中四种嘌呤保留时间与标准品保留时间不能完全对应，黄嘌呤在标准品与食品检测中的保留时间前后甚至相差两分钟。同时，标准品中鸟嘌呤、腺嘌呤峰相隔太近可能导致食品中两种嘌呤测定时的峰重叠，影响实际食品嘌呤检测的结果。四种嘌呤峰的保留时间在23.414分钟左右，若用于大批量食品的检测时间消耗较长，同时因检测时长较长所带来的流动相试剂的用量将增加，检测成本相应增加。

发明内容

针对检测时间长，且四种嘌呤之间易发生重合，检测结果不可靠的问题，本发明提供嘌呤检测方法。

为达到发明目的，本发明提供一种嘌呤检测方法，包括如下步骤：

将待检测样品进行预处理；

利用液相色谱分析仪对预处理后的待检测样品进行分析，

其中，液相色谱分析仪的流动相包括甲酸铵溶液和甲醇；

甲酸铵溶液为0.3g～0.4g甲酸铵溶于500ml超纯净水中制成，甲酸铵溶液的pH值为3.5～3.59；甲酸铵溶液与甲醇的比例(按体积计)为：97～99:3～1；液相色谱分析仪的流速为0.8～1.2mL/min。

在其中一个实施例中，甲酸铵为0.3153g。

在其中一个实施例中，甲酸铵溶液的PH值为3.54～3.56。

在其中一个实施例中，甲酸铵溶液的PH值为3.55。

在其中一个实施例中，甲酸铵溶液与所述甲醇的比例为98:2。

在其中一个实施例中，液相色谱分析仪的流速为1.2mL/min。

在其中一个实施例中，液相色谱仪的固定相为Waters Atlantis T3色谱柱。

在其中一个实施例中，将待检测样品进行预处理的步骤中，具体包括如下步骤：