[发明专利]一种樟叶越桔生根及移栽炼苗方法

说明书

本发明属于樟叶越桔栽培技术领域，公开了一种樟叶越桔生根及移栽炼苗方法，以樟叶越桔增殖苗为基础，从生根激素种类及用量的比较、生根培养基的筛选、炼苗基质的筛选三方面进行分析；筛选出的基本生根培养基为IBA2.0mg.L^‑1+1/4MS+活性炭0.1g.L^‑1+白砂糖15g.L^‑1+琼脂5g.L^‑1。本发明是以樟叶越桔增殖苗为基础，从生根激素种类及用量的比较、基本生根培养基的筛选、炼苗基质的筛选三方面进行了进一步的分析，提高其增殖苗生根率及炼苗成活率，为樟叶越桔的工厂化培养提供了一定的科学依据和技术支持。

技术领域

本发明属于樟叶越桔栽培技术领域，尤其涉及一种樟叶越桔生根及移栽炼苗方法。

背景技术

植物组织培养技术是在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生成细胞或完整植株的技术。其主要作用就是可以实现材料呈几何指数的快速增殖。一般可划分为无菌体系的建立、增殖培养、生根培养、炼苗移栽四个阶段，只有当各个阶段的技术问题得以解决，然后有机地结合才能实现组培苗的快速繁殖。目前樟叶越桔的植物组织培养研究主要停留在增殖培养、生根培养阶段，而进一步的炼苗移栽则未见报道。

樟叶越桔(Vaccinium dunalianum Wight)，为杜鹃花科越桔属常绿灌木。樟叶越桔幼嫩叶芽，因形似雀嘴呈锥状，在云南彝族民间又称“雀嘴茶”，据记载自明代开始就作为一种茶代用品长期饮用至今，具有祛风除湿、舒筋活络等功效^[1]。其果实营养丰富，具有较高的药用和保健价值^[2]，樟叶越桔是一种富含咖啡酰熊果苷类物质的特殊资源植物，其主要成分可抑制黑色素生成，活性优于熊果苷，且毒性仅为熊果苷的1/2。由于熊果苷作为次生代谢产物通常以微量形式存在于植物体中，且天然植物来源困难，因此,樟叶越桔有望作为熊果苷天然替代品资源加以应用，具有重要的开发价值。近年来，由于樟叶越桔目前仍处于野生阶段，生长缓慢，而市场对于雀嘴茶及咖啡酰熊果苷的需求量不断，导致野生资源被过度采挖，数量急剧下降。

由此，迫切需要利用现代生物学技术来快速增加樟叶越桔数量，一方面可为植物种质资源提供保护，另一方面也可满足市场需求。

目前为止，国内外对越桔属多种植物的组织培养和快繁技术及育苗炼苗技术都已有报道，且蓝莓等的组织培养技术相对较为成熟，使用快繁技术可使蓝莓茎段成活率高达到85.7％，愈伤组织诱导率可达88％，和加卫、徐中志等人以云南越橘继代培养的芽苗转接于1/2WPM+NAA0.05mg.L^-1的生根培养基中，5周后基部可长出2～4条1～1.5cm长的不定根，生根率78％。瓶盖打开，炼苗3d，然后从培养基中取出，洗去根部培养基，移入蛭石和腐殖土(1：2)混合的基质中，保湿遮阴，成活率可达90％以上。孙阳等人对Siem、Bluecrop和Toro3个蓝莓品种叶片离体再生研究，以改良WPM培养基，结果表明，ZT浓度在0.15mg.L^-1时对越橘叶片离体再生效果最佳，IBA对越橘叶片离体再生能力影响较小；不同品种之间的叶片生根速率差异十分显着，在相同生长素浓度下，3个品种的生根率由低到高依次是Bluecrop<Sierra<Toro。