[发明专利]一种生物膜生物量的检测方法

说明书

本发明公开了一种生物膜生物量的检测方法，包括实验材料与方法：载片插入杯壁楔形槽内，通过中轴转子的转动带动水体流动，从而在载片表面形成剪切力，模拟；生物量分析方法：VIS‑7220可见光分光光度计，DTL‑300型超声波清洗机试验药剂均为分析纯；HPC法和脂磷法：生物量的分析方法分别采用异样菌平板计数法（HPC）和脂磷法，培养温度为22℃，培养时间为7天利于不同生长特性的细菌生长，通过生物培养法获取生物量；其优点：目的解决生物量对于数值范围为0.100‑0.001 g/g活性炭存在误差较大，有效性较差，平板菌落计数法中因为大部分的微生物不可培养，而造成检测出的生物量远小于实际的生物量，通过脂磷法检测生物量较为灵敏，适用范围宽，能准确有效评价微生物数量。

技术领域

本发明涉及一种生物量指标测试技术，尤其是涉及一种生物膜生物量的检测方法。

背景技术

生物量，是生态学术语，或对植物专称植物量，是指某一时刻单位面积内实存生活的有机物质(干重)(包括生物体内所存食物的重量)总量，通常用kg/m2或t/hm2表示。植物群落中各种群的植物量很难测定，特别是地下器官的挖掘和分离工作非常艰巨。出于经济利用和科研目的的需要常对林木和牧草的地上部分生物量进行调查统计，据此可以判断样地内各种群生物量在总生物量中所占的比例。

目前在测定生物量方面的方法有很多，但是很多方法都有一定的局限性，比如其中的比重法，比重法测定生物量对于数值范围为0.100-0.001g/g活性炭存在误差较大，有效性较差，平板菌落计数法中因为大部分的微生物不可培养，而造成检测出的生物量远小于实际的生物量。

发明内容

针对现有技术的不足之处，本发明的目的在于提供一种生物膜生物量的检测方法，目的解决生物量对于数值范围为0.100-0.001g/g活性炭存在误差较大，有效性较差，平板菌落计数法中因为大部分的微生物不可培养，而造成检测出的生物量远小于实际的生物量，通过脂磷法检测生物量较为灵敏，适用范围宽，能准确有效评价微生物数量。

本发明的技术方案概述如下：

一种生物膜生物量的检测方法，包括实验材料与方法、生物量分析方法、HPC法和脂磷法，实验材料与方法：所述载片插入杯壁楔形槽内，通过中轴转子的转动带动水体流动，从而在载片表面形成剪切力，模拟实际给水管道；生物量分析方法：所述VIS-7220可见光分光光度计，DTL-300型超声波清洗机试验药剂均为分析纯；HPC法和脂磷法：所述生物量的分析方法分别采用异样菌平板计数法(HPC)和脂磷法，培养基采用R2A培养基，R2A培养基属于低营养培养基，更能针对给水管网的贫营养环境，其培养温度为22℃，更接近实际管网温度，培养时间为7天，更有利于不同生长特性的细菌生长，其中将生物膜剥落于无菌水中形成悬浮菌液，通过生物培养法获取生物量。

其方法如下：

绘制标准曲线：

(5)分别取磷标准使用溶液0.0、0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mL于25mL具塞刻度管中，加水至25mL，混匀。

(6)向上述比色管中分别加入4mL过硫酸钾，将盖塞紧后，用纱布和橡皮筋将比色管的玻璃塞扎紧固定，放在500mL烧杯中置于蒸汽压力灭菌锅中加热(121℃，30min)，待压力降为零后，取出放冷，然后用蒸馏水稀释至标线。

(7)移液枪加入1mL抗坏血酸溶液混匀，30s后加入2mL钼酸盐溶液混合均匀。

(8)室温放置15min后，使用光程为30mm石英比色皿，在700nm波长下，以水为参比，测定各溶液的吸光度，扣除空白试验的吸光度后，根据吸光度值及对应溶液浓度绘制磷标准曲线。