[发明专利]卵巢癌的病理切片染色组合物有效

专利信息
申请号: 201810014628.5 申请日: 2018-01-08
公开(公告)号: CN108458911B 公开(公告)日: 2019-05-14
发明(设计)人: 郭玲;任春娜;尹国华;栗春敏;李莲娣;周淑芬 申请(专利权)人: 牡丹江医学院
主分类号: G01N1/30 分类号: G01N1/30
代理公司: 北京辰权知识产权代理有限公司 11619 代理人: 郝雅娟
地址: 157011 黑龙江省牡丹江市爱民*** 国省代码: 黑龙江;23
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摘要:
搜索关键词: 染色液 卵巢癌 苏木精 病理切片染色 硫酸亚铁 染色能力 制备 蒸馏水 人体无毒副作用 细胞核 氧化剂 病理组织 硫酸铝钾 染色效果 无水乙醇 制备过程 冰醋酸 碘酸钠 壳聚糖 染色质 氧化膜 染色 核膜 核仁 微球 有效期 配制 沉淀 耗时 清晰 安全
【说明书】:

发明涉及一种卵巢癌的病理切片染色组合物,所述组合物包括苏木精、无水乙醇、硫酸铝钾、碘酸钠、冰醋酸、硫酸亚铁、硫酸亚铁壳聚糖PLGA双重微球和蒸馏水。本发明的苏木精染色液组成简单,成本低廉,染色液安全有效,对人体无毒副作用,制备过程中对氧化剂的用量和氧化时间无严格要求,有效降低了其制备的难度,且制备耗时明显缩短,染色液一经配制完成,染色能力可长期保持,不会形成氧化膜和沉淀,极大提高了苏木精染色液的有效期,对多种病理组织具有优异的染色能力,尤其对于卵巢癌的染色效果更佳,细胞核、染色质、核膜、核仁染色清晰。

技术领域

本发明属于诊断学技术领域,具体涉及一种卵巢癌的病理切片染色组合物。

背景技术

临床中取部分有病变的组织或者脏器经过处理使之固定硬化后切片并染色,通过显微镜下观察病理变化,从而做出病理诊断,其中染色步骤经典的包括苏木精-伊红染色法,简称HE染色法,是利用碱性的苏木精染色液将细胞核内的染色质与胞质内的核酸染成紫蓝色,利用酸性的伊红使细胞质和细胞外基质中的成分染成红色。

苏木精-伊红染色法中的染料之一的苏木精是一种纯天然染料,从主产墨西哥坎偑切的苏木树提炼而来,是最常用的染料之一,可用于蚕丝、毛皮和皮革的染色以及棉布的印花,用不同的媒染剂可得到蓝色或黑色。苏木精不能直接染色,必须使其氧化得到氧化苏木精(又称苏木素)后才能使用,这也叫做“成熟”。苏木精的“成熟”过程需时较长,配置后时间愈久,染色力愈强。苏木精的成熟一般有两种方法,一是天然成熟,苏木精与其它试剂混合好后,暴露于阳光或亮处,在自然光的作用下,慢慢地氧化成熟,但时间较长,一般需12周左右。二是加入化学试剂如氧化汞、碘酸钠、高锰酸钾、重铬酸钾或过氧化氢等氧化剂促进其成熟,历年来发展出多种多样的苏木素染液,包括Harros苏木精液、Ehrlich苏木精液、Mayer苏木精液、Hansen苏木精液、Gill半氧化苏木精液、重铬酸钾氧化苏木精液、Delafield苏木精液、碘酸钠氧化苏木精液等。

自然成熟的苏木精所需周期长,成本高,使用麻烦,而人工成熟的苏木精除了苏木精的过度氧化从而导致其染色力快速减弱甚至消失外,氧化汞等物质存在毒副作用,还会在染液表面及容器壁上产生氧化膜、产生沉淀,导致了染色能力下降过快,有效期短,不能久存。针对于人工成熟的苏木精所存在的问题,发展出了半氧化苏木精液,其原理为使大部分的苏木精在较短时间内氧化为氧化苏木精,从而具备染色能力,其余部分的苏木精则处于半氧化的状态,在继续使用的过程中自然氧化,从而有效防止了氧化苏木精的过氧化,通过自然氧化还可以不断补充消耗的色素来保持染液的相对稳定和比较持久的染色能力,但半氧化的苏木精染液是通过在制备之初牺牲掉部分染色能力为代价而减少氧化苏木精的过氧化,人为的降低了染色液的染色能力,且制备方法复杂,需要根据染液量的多少选择适当的氧化剂用量和氧化时间,当半氧化状态的苏木精经约3个月的自然成熟后仍面临氧化苏木精过氧化所导致的染色能力下降过快,有效期短,不能久存的问题。

本发明既是提供一种制备方法简单、染色能力强,且长期有效的苏木精染色组合物,可广泛应用于卵巢癌等的病理切片的染色。

发明内容

本发明的目的提供一种制备方法简单、染色能力强,且长期有效,可广泛应用于卵巢癌等的病理切片的染色组合物,所述组合物包括苏木精、无水乙醇、硫酸铝钾、碘酸钠、冰醋酸、硫酸亚铁、硫酸亚铁壳聚糖PLGA双重微球和蒸馏水;

优选的所述组合物包括苏木精2-4g、无水乙醇200-400mL、硫酸铝钾15-20g、碘酸钠0.4-0.8g、冰醋酸15-30mL、硫酸亚铁0.1-0.3g、硫酸亚铁壳聚糖PLGA双重微球0.2-1.0g、蒸馏水600-800mL;

优选的所述组合物包括苏木精3g、无水乙醇300mL、硫酸铝钾20g、碘酸钠0.7g、冰醋酸30mL、硫酸亚铁0.2g、硫酸亚铁壳聚糖PLGA双重微球0.8g、蒸馏水700mL。

更优选的,所述硫酸亚铁壳聚糖PLGA双重微球通过以下方法制备:

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