[发明专利]一种rExendin-4药物活性的检测试剂盒及检测方法和应用

说明书

本发明提供了一种rExendin‑4药物活性的检测试剂盒及检测方法和应用，属于医学检验与药物分析领域。本发明提供的rExendin‑4药物活性的检测试剂盒，通过简单的试剂能快速准确的测定rExendin‑4药物活性，将该试剂盒应用到rExendin‑4药物活性，能较好的提高检测的速度和准确性；rExendin‑4药物活性的检测方法通过简单的实验步骤，快速灵活的反应，测得药物的活性，具有较大的实际应用价值和社会价值。

技术领域

本发明涉及医学检验和药物分析领域，具体而言，涉及一种 rExendin-4药物活性的检测试剂盒及检测方法和应用。

背景技术

药物的研制过程中，生物学活性检测方法是药物筛选以及质量控 制的重要评价参数，该方法必须通过方法验证，满足专属性、精密度、 准确度等方法验证方面的要求，这样才能保证生物学活性检测结果的 可靠性，才能用于指导药物的筛选以及质量控制。

重组促胰岛素分泌素(rExendin-4)属于胰高血糖素样肽-1 (GLP-1)类药物，可以控制胰岛素和胰高血糖素的分泌。目前常用 的针对rExendin-4的生物学活性测定方法，是酶联免疫吸附法(EIA 法)，该法依据药物引发细胞内第二信使cAMP含量上升，通过试剂 盒检测cAMP来间接反映药物生物学活性。大鼠胰岛素瘤细胞 RIN-m5f作为天然的细胞模型可用于检测GLP-1类似物的活性,但 RIN-m5f难以培养和生长缓慢,贴壁培养过程中易脱落，使其应用受 到限制。并且在利用cAMP检测试剂盒检验cAMP过程中操作步骤 繁琐，增加了人为操作引起误差的风险。实验响应值不高。更重要的 是，在已经报道的针对GLP-1药物的生物学活性检测方法中，缺乏 对检测体系专属性、精密度、准确度等方面的方法验证与评价，难以 确保检测结果的准确性与可靠性。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种rExendin-4药物活性的检测试 剂盒，该试剂盒能方便的用于检测胰高血糖素样肽-1(GLP-1)类药 物的活性。

本发明的第二目的在于提供上述rExendin-4药物活性的检测试 剂盒在rExendin-4药物活性的检测中的应用。

本发明的第三目的在于提供一种rExendin-4药物活性的检测方 法，通过本检测方法能准确、特异且灵敏的检测rExendin-4药物活性， 操作简单快捷。

为了实现本发明的上述目的，采用以下技术方案：

一种rExendin-4药物活性的检测试剂盒，检测试剂盒包括细胞生 长培养基、分析培养基、质量分数28％-33％的BSA溶液和化学发光 剂。

上述rExendin-4药物活性的检测试剂盒在rExendin-4药物活性的 检测中的应用。

一种rExendin-4药物活性的检测方法，包括：

将rExendin-4活性参考品和rExendin-4供试品分别使用分析培养 基溶解，然后进行倍比稀释，分别处理荧光效应细胞并培养，得到荧 光反应细胞；

将荧光反应细胞进行室温平衡后与化学发光剂进行混合反应，测 定荧光反应细胞的荧光数据；

通过荧光数据得到rExendin-4活性参考品和rExendin-4供试品半 数有效浓度值；

通过rExendin-4活性参考品和rExendin-4供试品半数有效浓度值 计算得到rExendin-4供试品的活性数据。