[发明专利]一种检测PDL-1mRNA基因表达量的试剂盒及其应用在审
| 申请号： | 201810007130.6 | 申请日： | 2018-01-04 |
| 公开（公告）号： | CN108085373A | 公开（公告）日： | 2018-05-29 |
| 发明（设计）人： | 裴兵 | 申请（专利权）人： | 裴兵 |
| 主分类号： | C12Q1/6851 | 分类号： | C12Q1/6851;C12Q1/6886 |
| 代理公司： | 北京科家知识产权代理事务所(普通合伙) 11427 | 代理人： | 陈娟 |
| 地址： | 223900 江苏省*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 基因表达量 试剂盒 种检测 特异性引物序列 特异性引物 上游引物 下游引物 表达量 检测 应用 | ||
1.一种检测PDL-1 mRNA基因表达量的试剂盒，主要包括特异性引物和PCR反应试剂；其特征在于所述特异性引物序列如下：
PDL-1上游引物：如SEQ ID NO.1所示，5’-AAGCACACGTGCCAAAGAATC-3’；
PDL-1下游引物：如SEQ ID NO.2所示，5’-TCTCGACGACGACGTTTCC-3’。
2.如权利要求1所述的检测PDL-1 mRNA基因表达量的试剂盒，其特征在于：所述的试剂盒还包括PDL-1基因标准品：含有PDL-1基因编码序列的重组载体，基因编码序列如SEQ IDNO.3所示，
3.如权利要求1所述的检测PDL-1 mRNA基因表达量的试剂盒在检测人PDL-1 mRNA基因表达量中的应用。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述应用方法如下：
(1)按照标准采集待测样本，提取样本RNA；
(2)以样品RNA为模板，进行反转录反应，得到样品的cDNA；
(3)以梯度浓度的人PDL-1基因检测标准品为模板，加入所述特异性引物和反应试剂，组成反应体系，进行PCR扩增，绘制标准曲线；
(4)以样品cDNA为模板，加入所述特异性引物和反应试剂，组成反应体系，进行扩增，扩增结果对照标准曲线，获得PDL-1基因表达量。
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于：所述PCR反应条件如下：95℃预变性15min；95℃变性15s、60℃退火32s，40个循环。
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