[发明专利]一种使用透明质酸包裹的金纳米粒子评价烟气暴露对细胞损伤的方法有效
申请号: | 201810003826.1 | 申请日: | 2018-01-03 |
公开(公告)号: | CN108120705B | 公开(公告)日: | 2020-07-21 |
发明(设计)人: | 田永峰;张玉丰;杨柳;段沅杏;赵伟;赵杨;朱东来;汤建国;张霞;韩熠;巩效伟;洪鎏;李寿波;王程娅;李廷华;袁大林;王汝;曾旭;孙志勇;陈永宽;缪明明 | 申请(专利权)人: | 云南中烟工业有限责任公司 |
主分类号: | C12Q1/02 | 分类号: | C12Q1/02;G01N21/64 |
代理公司: | 北京市领专知识产权代理有限公司 11590 | 代理人: | 杨兵 |
地址: | 650231 云*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 使用 透明 包裹 纳米 粒子 评价 烟气 暴露 细胞 损伤 方法 | ||
1.一种使用透明质酸包裹的金纳米粒子评价烟气暴露对细胞损伤的方法,其特征在于,包括如下步骤:
A、将金纳米粒子充分分散于透明质酸胶体水溶液中,然后对混合物进行冷冻喷雾干燥,得到分散的表面包覆有透明质酸水凝胶的金纳米粒子,即为所述透明质酸包裹的金纳米粒子;金纳米粒子本身具有荧光介质的属性,在基因检测中提供荧光;所述金纳米粒子为棒状纳米粒子,其长度为20-50nm,其直径为8-30nm;
B、将含有受试细胞的培养液均分为两份,一份直接加入所述透明质酸包裹的金纳米粒子,所述透明质酸包裹的金纳米粒子能够与活体细胞中的mRNA结合,进而结合有所述透明质酸包裹的金纳米粒子的mRNA通过碱基互补配对原则进行基因杂交形成mRNA-DNA,结合有所述透明质酸包裹的金纳米粒子的mRNA-DNA在氩离子激光器发出激光的照射下能发生金纳米粒子外层电子跃迁,从而发出荧光;在充分反应后,测定的荧光强度记为初始荧光强度;
C、向另一份含有受试细胞的培养液中加入含有烟气捕集物的待测溶液,并在适合细胞存活的温度下静置足够长时间后,再加入所述透明质酸包裹的金纳米粒子,由于所述透明质酸包裹的金纳米粒子能够与活体细胞中的mRNA结合,进而结合有所述透明质酸包裹的金纳米粒子的mRNA通过碱基互补配对原则进行基因杂交形成mRNA-DNA,而死去的细胞则不会发生上述过程;检测荧光强度并与初始荧光强度相比较,从而检测存活细胞的比例,并根据存活细胞的比例来评价烟气捕集物的细胞毒性。
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