[发明专利]减少为了生产氨基酸或氨基酸衍生产物的亚胺/烯胺的积累有效
| 申请号: | 201780097277.2 | 申请日: | 2017-11-29 |
| 公开(公告)号: | CN111406104B | 公开(公告)日: | 2023-08-08 |
| 发明(设计)人: | 周豪宏;陈玲;刘修才 | 申请(专利权)人: | 上海凯赛生物技术股份有限公司;CIBT美国公司 |
| 主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N5/10;C12N15/31;C12N15/67;C07K14/245;C12P13/08;C12R1/19;C12R1/15 |
| 代理公司: | 北京永新同创知识产权代理有限公司 11376 | 代理人: | 栾星明;王子楠 |
| 地址: | 201203 上海市浦东新*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 减少 为了 生产 氨基酸 衍生 产物 亚胺 积累 | ||
1.一种包含外源多核苷酸的经遗传修饰的宿主细胞,所述外源多核苷酸包含编码亚胺/烯胺脱氨酶多肽的核酸,相对于未修饰成表达所述外源多核苷酸的相对应的宿主细胞,所述经遗传修饰的宿主细胞增加了氨基酸或氨基酸衍生物的量;并且与野生型宿主细胞相比,所述经遗传修饰的宿主细胞具有增加所述氨基酸或所述氨基酸衍生物生产的至少一种另外的遗传修饰,其中所述氨基酸是赖氨酸并且所述氨基酸衍生物是尸胺,以及所述亚胺/烯胺脱氨酶多肽为SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:12的氨基酸序列。
2.根据权利要求1所述的经遗传修饰的宿主细胞,其中所述亚胺/烯胺脱氨酶多肽对所述宿主细胞是异源的。
3.根据权利要求1所述的经遗传修饰的宿主细胞,其中所述亚胺/烯胺脱氨酶多肽包含对所述宿主细胞是天然的氨基酸序列。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的经遗传修饰的宿主细胞,其中所述外源多核苷酸包含在引入到所述细胞中的表达载体中,其中所述表达载体包含可操作地连接到启动子的所述外源多核苷酸。
5.根据权利要求1-3中任一项所述的经遗传修饰的宿主细胞,其中所述外源多核苷酸被整合到宿主染色体中。
6.根据权利要求1-3中任一项所述的经遗传修饰的宿主细胞,其中所述宿主细胞过表达外源赖氨酸脱羧酶多肽。
7.根据权利要求6所述的经遗传修饰的宿主细胞,其中所述外源赖氨酸脱羧酶多肽是CadA多肽。
8.根据权利要求1-3中任一项所述的经遗传修饰的宿主细胞,其中所述宿主细胞过表达一种或多种外源赖氨酸生物合成多肽。
9.根据权利要求8所述的经遗传修饰的宿主细胞,其中所述外源赖氨酸生物合成多肽是天冬氨酸激酶、二氢吡啶二羧酸合酶、二氨基庚二酸脱羧酶、天冬氨酸半醛脱氢酶、二氢吡啶甲酸还原酶或天冬氨酸转氨酶。
10.根据权利要求9所述的经遗传修饰的宿主细胞,其中所述天冬氨酸激酶、二氢吡啶二羧酸合酶、二氨基庚二酸脱羧酶、天冬氨酸半醛脱氢酶、二氢吡啶甲酸还原酶或天冬氨酸转氨酶是LysC、DapA、LysA、Asd、DapB或AspC多肽。
11.根据权利要求1-3中任一项所述的经遗传修饰的宿主细胞,其中所述宿主细胞过表达外源CadA、LysC、DapA、LysA、Asd、DapB和AspC多肽。
12.根据权利要求1-3中任一项所述的经遗传修饰的宿主细胞,其中所述宿主细胞属于埃希氏菌属(Escherichia)、哈夫尼菌属(Hafnia)或棒状杆菌属(Corynebacterium)。
13.根据权利要求12所述的经遗传修饰的宿主细胞,其中所述宿主细胞是大肠杆菌(Escherichia coli)、蜂房哈夫尼菌(Hafnia alvei)或谷氨酸棒状杆菌(Corynebacteriumglutamicum)。
14.根据权利要求13所述的经遗传修饰的宿主细胞,其中所述宿主细胞是大肠杆菌。
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