[发明专利]SNAP25反义寡核苷酸

说明书

提供靶向人类SNAP25前mRNA的3'剪接位点的肽核酸衍生物。所述肽核酸衍生物至少有效诱导细胞中人类SNAP25 mRNA的剪接变体，并可用于通过局部给予安全治疗涉及人类SNAP25蛋白表达的皮肤病适应症或病症。

本发明涉及用于治疗由SNAP25蛋白介导的皮肤病适应症或病症的靶向人类SNAP25前mRNA的肽核酸衍生物，并要求2017年1月6日递交的美国临时申请号62/443,262的优先权的益处，所述临时申请通过参考以其全部结合到本文中。

发明背景

胞吞作用为细胞将大分子摄入细胞的过程。与此同时，胞吐作用为细胞分泌细胞内物质或内容物到细胞外的过程。有大量类型的细胞巧妙地采用胞吐作用来分泌囊泡内容物或物质到细胞外。神经元细胞已经演变成通过胞吐作用分泌神经递质，用于其注定的与相邻神经元细胞或相邻组织进行通讯的生理作用。作为胞吐作用的另一个实例，肥大细胞通过胞吐作用释放组胺并且结果募集免疫细胞。

分泌囊泡含有各种类型的囊泡物质，其将根据细胞类型而变化。例如，神经元细胞中的突触前囊泡位于突触前神经元末梢并含有神经递质的混合物。囊泡膜与细胞质膜融合以将神经递质释放到突触区域，以生理控制或影响相邻的细胞或组织。胰岛中的β-细胞具有含有胰岛素的囊泡，并且囊泡经历涉及膜融合的胞吐作用以在响应血糖水平时将胰岛素释放到血流中[ Cell Metabolism, vol 5, 237-252 (2007)]。

胞吐作用为涉及囊泡膜与细胞质膜融合的细胞过程。有两种类型的胞吐作用，即“组成型”和“调节型”。“组成型”胞吐作用在没有刺激信号的情况下自发发生。与此同时，“调节型”胞吐作用由特定的刺激信号(例如运动神经元细胞中细胞内钙离子浓度的增加)触发[ Ann. Rev. Cell Dev. Biol. vol 16, 19-49 (2000)]。

突触接头处的胞吐作用：神经元细胞使用专门用于神经元细胞的称为“突触接头”的机器彼此通讯。在相邻神经元细胞之间的突触接头处发生的胞吐作用过程在图1A中示意性地说明。首先，含有神经递质颗粒的囊泡响应刺激信号(比如神经元轴突感知的钙离子浓度的变化)与突触前细胞质膜融合。在膜融合后，神经递质颗粒被释放到突触前接头。然后神经递质颗粒扩散并与在相邻神经元细胞的树突膜上表达的神经递质受体结合。最后，受体在与神经递质分子复合后被激活，并转导从相邻神经元细胞的轴突传递的神经元信号。

神经肌肉接头处的胞吐作用：运动神经元利用神经肌肉接头处的胞吐作用控制肌肉的运动。在肌肉中，运动神经元的轴突分支成许多轴突末梢，以与肌细胞的肌纤维膜形成接头，即神经肌肉接头[ Nat. Rev. Neuroscience, vol 2, 791-805 (2001)]。神经元轴突末梢和肌细胞膜之间的间隙称为突触间隙，尺寸为约30 nm。

当动作电位形式的神经脉冲到达运动神经元的轴突末梢时，在神经肌肉接头处开始突触传递。运动神经元轴突通过胞吐作用将神经递质分子(即脊椎动物体内的乙酰胆碱)释放到突触间隙中，并且在肌细胞膜上表达的乙酰胆碱受体在与乙酰胆碱复合后激活，这触发肌纤维的收缩。在神经元轴突和肌细胞之间的神经肌肉接头中发生的胞吐作用过程在图1B中示意性地说明。