[发明专利]用于检测缺血性发生的慢性脑病理学的诊断试剂盒

说明书

本发明涉及诊断，更具体地，涉及一组用于鉴定缺血源脑损伤的试剂，快速方法和装置。本发明的特征在于使用形成为NMDA神经受体亚单位的两个片段的产物的免疫活性杂合肽。描述了一种装置，其能够快速且方便地测试存在于患者血液中并识别杂合肽的自身抗体。自身抗体检测方法基于侧流免疫层析法。本发明可用于预防性医学检查(筛查缺血性起源的慢性脑损伤)；来自门诊诊所的内科医生或神经科医生在院前阶段鉴定失代偿性慢性脑缺血；以神经外科和运动医学为目的，用于诊断创伤性脑损伤患者的迟发性脑缺血。

发明领域

本发明涉及诊断辅助设备，即用于快速检测哺乳动物的慢性脑病，特别是在血管和创伤性脑损伤中发生的慢性缺血、内毒素和细胞毒性水肿(脑水肿)，以及复发性缺血事件风险的方法、装置和试剂盒。本发明可用于历史上颅脑外伤、中风或微创的患者的预防性医学检查或初步检查，并将能够在神经病学、创伤学和运动医学中实施最佳治疗措施。

发明背景

中风以及缺血性发生的大脑的其他急性和慢性病症，对人们的健康和生命构成严重威胁。对这些情况进行早期和高度特异性诊断的重要性不容低估；患者康复的发生率、严重程度和其他参数取决于正确的诊断。缺血性中风对于在疾病发作后的前三至六小时内进行诊断尤为重要，有进行溶栓治疗的可能性。尽管取得了成功，在慢性病理学背景下，仍然需要新的、客观的方法来诊断缺血急性期复发的风险，以及与它们相关的内毒素和细胞毒性水肿(脑水肿)的出现以及随后的小血管疾病。这些病症的诊断通常基于神经影像学的方法，例如计算机断层扫描和磁共振成像(MRI)，其需要识别大脑的受影响区域及其损伤程度。据估计，由于禁忌症、病情不稳定或设备无法进入，英国高达40％的中风患者无法通过放射学方法及时诊断(Hand PJ等.(2005)神经病学杂志76：1525-1527)。在许多其他国家，设备可用性问题要严重得多，因此，这类患者的比例更高。另一个问题是诊断和预测短暂性脑缺血发作(TIA)或微搏动的后果，症状持续1小时至24小时。在许多情况下，历史上患有中风或TIA的患者在短时间内记录至少一次复发性中风。忽视患者的TIA症状可导致慢性脑病的发展。尽管已经了解某些决定复发性或慢性中风发生的因素的作用，例如动脉粥样硬化、高血压或糖尿病，目前，不可能使用这些先前因素监测患者的病情，特别是对于潜在的慢性中风，使用廉价的生化测试来快速有效地评估复发性中风的风险。

除了可用的神经成像方法之外，现有技术中已知几种用于诊断中风或TIA的免疫活性生物标志物(Bazarian JJ等，PLoS One 2014,9，e94734；Wang KK等，J Neurotrauma2016,33,1270-1277；EG Sorokina等，Journal of Neurology and Psychiatry2010,110,30-35；Guaraldi F等，J Clin Med 2015,4,1025-1035)，但是它们都尚未在临床实践中应用，主要是由于缺乏特异性。同样，目前市场上还没有有效的工具来预测慢性中风或微中风的发展。因此，为检测慢性缺血创建特定的廉价快速检测的问题仍然非常紧迫，特别是当与脑水肿(内毒素或细胞毒性水肿)相关时。本发明具有解决该任务所需的许多特性，因此能够扩大用于检测慢性脑损伤和复发性缺血事件的风险的工具库。

发明内容

已知NMDA神经受体的循环血液片段的水平可以用作临床评估中风或TIA患者的诊断工具。NMDA受体代表离子型谷氨酸受体的亚类，其选择性地结合N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)。本发明的目的是提供一种方法和装置，用于快速方便地检测哺乳动物缺血性发病的慢性脑病，特别是复发性中风或微中风、与脑水肿相关的迟发性慢性缺血、血管或创伤性脑损伤导致神经组织细胞死亡的风险。为了解决该目的，获得在病理条件下以NMDA神经受体亚单位的两个亚基片段的单个片段形式形成的杂合肽，并通过实验测试(在申请WO/2002/012892中描述了形成这种杂交体的可能性)。