[发明专利]寨卡病毒感染的血清学测定

说明书

本发明提供了用于检测向某些病毒的暴露和受某些病毒的感染的组合物、方法和试剂盒。具体地，本发明允许对向病毒的暴露和受病毒的感染进行快速差异血清学检测。具体而言，本发明允许对向寨卡病毒(ZIKV)的暴露和受寨卡病毒(ZIKV)的感染进行快速血清学检测。

政府支持声明

本发明是受政府支持在NIH批准号U19AI109761下完成的。因此，美国政府享有本发明的某些权利。

技术领域

本发明涉及使用高通量血清学检测向病毒的暴露，尤其是检测向寨卡病毒(ZIKV)的暴露的领域。

背景技术

寨卡病毒(ZIKV)是一种新兴的蚊媒病毒，其影响包括非洲、亚洲和美洲在内的几个主要大陆，并已被世界卫生组织(WHO)视为全球性紧急情况。ZIKV感染会对孕妇带来高风险，因为它与严重的胎儿脑异常，诸如小头畸形、颅内钙化和胎儿脑破裂序列以及眼部异常有因果联系(Rasmussen等人2016)。此外，ZIKV感染可能会引发格林-巴利综合征(Guillain-Barré syndrome)的风险增加(Broutet等人2016)。

在城市和郊区环境中，ZIKV在人-蚊-人传播循环中传播。除蚊传播外，还有证据表明ZIKV可以在怀孕期间从母亲传染给胎儿。另外，还报道了向伴侣的性传播。最后，尽管尚未报道通过输血传播ZIKV，但鉴于其他相关黄病毒的传播，很可能通过这种途径发生。

寨卡病毒是一种与登革热病毒(DENV)密切相关的黄病毒。ZIKV诊断常常基于临床症状和流行病学联系。寨卡病毒和登革热病毒以及其他病毒，即西尼罗河病毒(West Nilevirus)(黄病毒)和基孔肯雅病毒(chikungunya virus)(甲病毒)感染也呈现类似的临床症状，导致鉴别诊断困难。用于检测寨卡病毒基因产物的分子测定法可用于诊断活性感染，但无法提供对急性感染清除后可以影响子宫内后代发育的历史感染的了解。目前血清学测定法中ZIKV和DENV之间的交叉反应混淆了临床诊断和调查感染流行和与疾病的联系的工作。实际上，疾病控制和预防中心建议在噬斑减少中和试验(PRNT)中验证在当前ZIKVELISA中发现呈血清反应阳性的所有样品。PRNT昂贵、劳动强度大并且需要活病毒，因此，PRNT难以在临床微生物实验室中执行。

另外，ZIKV疫苗处于研究的最前沿。随着这些疫苗的开发，需要快速可靠的用于测试此类疫苗功效的测定法。

因此，需要灵敏、特异性且廉价的高通量血清学测定法来诊断ZIKV暴露。

发明内容

本发明提供了用于检测向某些病毒的暴露和受某些病毒的感染的组合物、方法、装置和试剂盒。具体地，本发明允许对向病毒的暴露和受病毒的感染进行快速差异血清学检测。具体而言，本发明允许对向寨卡病毒(ZIKV)的暴露和受寨卡病毒(ZIKV)的感染进行快速血清学检测。

用于检测向ZIKV的暴露和受ZIKV的感染的组合物、方法、装置和试剂盒包含分离和未分离的特异性肽，所述分离和未分离的特异性肽与ZIKV具有强烈反应性并且对ZIKV具有特异性，即为ZIKV抗体的反应性和特异性表位。

在ZIKV的NS2B区中鉴定出一种此类肽。在恢复期血清样品中，与ZIKV的特异性超过90％。这种肽具有以下氨基酸序列：

DITWEKDAEXTGNSPRLDVA，其中X为V或I(SEQ ID NO:1)。

因此，本发明的一个实施方案是与ZIKV抗体具有反应性并且对ZIKV抗体具有特异性的肽，其包含氨基酸序列DITWEKDAEXTGNSPRLDVA，其中X为V或I(SEQ ID NO:1)。

在恢复期血清样品中，沿着与ZIKV抗体具有超过50％的特异性的ZIKV蛋白质组还鉴定了12种其他肽。