[发明专利]腺相关病毒制剂

说明书

本发明提供了腺相关的液体和冻干的药物组合物。在代表性的方面，药物组合物包含：约5mM至约25mM的L‑组氨酸、约0mM至约150mM的氯化钠、约0.001％(w/v)至约0.01％(w/v)的聚山梨酯80(PS80)、约1％至约10％(w/v)的蔗糖、海藻糖或它们的组合，以及AAV。在代表性的方面，药物组合物进一步包括甘氨酸或甘露醇。本发明还提供了制备包含AAV的药物组合物的方法、治疗受试者的出血性病症的方法、以及储存AAV组合物的方法。

相关申请

本专利申请要求2016年11月4日提交的美国临时专利申请62/417,750的优先权，该临时专利申请通过引用整体并入本文。

背景技术

腺相关病毒(Adeno-associated virus,AAV)是一种小型无包膜病毒，病毒内包装有线性单链DNA基因组。AAV属于Parvoviridae科和Dependovirus属，因为AAV的增殖性感染(productive infection)仅在辅助病毒，例如腺病毒或疱疹病毒的存在下发生。即使在没有辅助病毒的情况下，AAV(血清2型)也可以通过整合到宿主人类基因组的染色体19q13.4中来实现潜伏。AAV是已知能够位点特异性整合的唯一哺乳动物DNA病毒(Daya和Berns，Clinical Microbiology Reviews，583-593页(2008))。

为了在临床中安全使用AAV，已在AAV基因组内的若干位置进行遗传修饰。例如，已在许多病毒载体的AAV基因组中去除病毒复制所需的Rep基因和位点特异性整合所需的元件。该重组AAV(rAAV)以染色体外状态存在，并且整合到基因组DNA的效率非常低。因此，即使未完全去除，rAAV在宿主细胞中诱导随机诱变的可能性也降低了。由于rAAV的这些特性和缺乏致病性，其作为基因治疗载体在临床前和临床应用的诸多方面显示出巨大的前景。临床上正在测试新的血清型和自身互补型载体。除了这些正在进行的载体开发之外，持续的努力还集中在能够有效地产生具有高纯度和高效价强度的高滴度量rAAV载体的可扩展制造工艺上。

AAV的研究还聚焦于旨在施用于人的AAV制剂。应理解，这种AAV制剂不仅应该安全、无菌且为良好生产规范(GMP)等级的，这些制剂还应表现出和促进AAV的长期稳定性，最大限度地减少制造、包装和储存过程中AAV效价的损失。该制剂还应进一步防止AAV吸附至包装和储存AAV的容器表面以及制造过程中使用的机械表面。虽然在该AAV制剂的设计上已投入了大量的研究，但仍然对改进的AAV制剂有需求。

发明内容

本发明公开了一种适合施用于人的制剂，该制剂解决了上述未满足的需求。有利地，在一些实施方式中，制剂适于AAV的长期储存，最大限度地减少AAV效价的损失，并且有利地防止可见颗粒的形成，并且防止AAV吸附至包装和储存AAV的容器表面以及制造过程中使用的机械表面。在代表性的方面，本发明的药物组合物包含：腺相关病毒(AAV)和约5mM至约25mM的缓冲剂、约0mM至约150mM的药学上可接受的盐、约0.001％(w/v)至约0.01％(w/v)的非离子表面活性剂和约1％(w/v)至约10％(w/v)的糖或糖醇。在某些实施方式中，制剂包含约50mM至约150mM的药学上可接受的盐。在某些实施方式中，制剂包含约0mM至小于约100mM的药学上可接受的盐。在某些实施方式中，制剂包含约30mM至小于约100mM的药理上可接受的盐。在某些实施方式中，制剂包含约20mM至约40mM的药学上可接受的盐。

在代表性的方面，本发明的药物组合物包含：AAV(例如AAV8)、约5mM至约25mM的L-组氨酸、约0mM至约150mM的氯化钠、约0.001％(w/v)至约0.01％(w/v)的聚山梨酯80(PS80)、约1％至约10％(w/v)的蔗糖、海藻糖、甘露醇或它们的组合。在某些实施方式中，该制剂包含约50mM至约150mM的氯化钠。在某些实施方式中，该制剂包含约0mM至小于约100mM的氯化钠。在某些实施方式中，该制剂包含约30mm至小于约100mM的氯化钠。在某些实施方式中，该制剂包含约20mM至约40mM的氯化钠。