[发明专利]使用干涉条纹增强对比度并发现焦点的透射照明成像

权利要求书

1.一种用于对未染色的生物细胞进行透射照明成像的方法，所述方法包括：

通过散射和混合未染色的生物细胞的样品上游的光的至少一部分来降低所述光的相干性；

使用降低相干性的光照射所述样品；

检测所述样品的图像，所述图像是通过所述降低相干性的光的至少一部分穿过由所述样品限定的平面产生的，

其中，在所述样品被充分散焦以在所述图像中形成干涉条纹的情况下，执行所述检测的步骤，当所述样品和物镜沿光轴相对彼此的位置从局部对比度最大值偏移时，所述样品被散焦，以及

其中，降低的步骤减小所述干涉条纹的强度；

使用光源产生作为光束的所述光的至少一部分，其中，使用在所述光源和所述样品之间的光路中设置的漫射器至少部分地执行所述降低的步骤；

在所述漫射器的上游将所述光束分裂成一对光束，其中，所述一对光束中的仅一个光束入射在所述漫射器上；以及

在所述漫射器的下游并在所述样品的上游将所述一对光束彼此组合。

2.如权利要求1所述的方法，其中，所述降低的步骤包括光通过所述漫射器的步骤和/或所述漫射器反射光的步骤。

3.如权利要求1所述的方法，其中，所述降低的步骤包括将彼此具有不同相干性的一对光束进行组合的步骤。

4.如权利要求3所述的方法，其中，所述一对光束由至少两个光源产生。

5.如权利要求3所述的方法，其中，所述一对光束是使用来自同一光源的光产生的。

6.如权利要求1所述的方法，还包括以下步骤：

使用成像检测器收集所述样品的多个图像，并且其中所述样品和物镜相对于彼此设置在对应的多个不同焦点位置；

计算所述多个图像中每一个的对比度；

确定所述对比度具有局部最大值或局部最小值处的焦点位置；以及

基于确定的焦点位置调整所述样品在所述图像检测器上的焦点，使得所述样品被充分散焦以在所述图像中形成干涉条纹；

其中，使用调整后的焦点执行所述检测的步骤。

7.如权利要求6所述的方法，其中，调整焦点的步骤包括将所述焦点调整到所述局部对比度最大值的步骤。

8.如权利要求6所述的方法，其中，收集多个图像的步骤包括在所述样品保持静止时移动所述物镜以产生所述对应的多个不同焦点位置中的每一个的步骤。

9.如权利要求1所述的方法，其中，使用至少一个固态光源产生所述光。

10.如权利要求1所述的方法，还包括：基于检测到的图像列举所述样品的样貌的步骤。

11.如权利要求10所述的方法，还包括：处理所述图像使得所述图像的分辨率被降低的步骤，其中，所述列举的步骤基于处理后的图像。

12.如权利要求11所述的方法，其中，所述干涉条纹包括一阶条纹和高阶条纹，其中，处理所述图像的步骤选择性地相对于所述一阶条纹消除所述高阶条纹。

13.如权利要求11所述的方法，其中，处理所述图像的步骤包括：将所述图像变换到频域的步骤、从变换后的图像中移除高频信息的步骤、以及将变换后的图像从频域逆变换到空间域的步骤。

14.如权利要求11所述的方法，还包括：分割处理后的图像的步骤，其中，列举的步骤基于分割后的图像。