[发明专利]具有改善的效力的艾美球虫疫苗

说明书

本发明涉及兽医寄生虫学和疫苗学的领域；更具体地，本发明涉及包含活艾美球虫卵囊和药学上可接受的载体的组合物。所述组合物的特征在于其包含TLR3激动剂。所述组合物可用于制备针对球虫病的家禽疫苗。所述疫苗可以例如作为粗喷雾应用于日龄雏鸡上。疫苗中的TLR3激动剂允许将艾美球虫卵囊的剂量降低最高达4倍，同时获得与不具有TLR3激动剂的疫苗相同水平的针对攻击的保护。或者，当在疫苗中采用常规剂量的艾美球虫卵囊时，TLR3激动剂引起免疫的较早起效，导致在攻击后肠病变评分的显著降低，其已经在接种疫苗后2周而不是3周。

本发明涉及兽医寄生虫学和疫苗学的领域；更具体地，本发明涉及包含活艾美球虫卵囊和药学上可接受的载体的组合物，制备所述组合物的方法，所述组合物在针对球虫病的家禽疫苗中的医学用途，以及所述疫苗的方法和用途。

艾美球虫是顶复门(phylum Apicomplexa)和球虫纲(class Coccidia)的原生动物寄生虫，并且在全世界存在。当感染宿主时，它们引起肠疾病-综合征(complex)，称作：球虫病。艾美球虫具有复杂的生命周期，该生命周期具有多个阶段，一些在宿主外发育。艾美球虫感染通过摄入形成孢子的卵囊而发生，并且可以从第一日龄发生。接下来，在肠中，释放子孢子，其随后通过侵入肠上皮细胞而在宿主的一段肠上定植。复制导致裂殖子释放阶段，和来自宿主的肠上皮细胞的破裂。接下来，裂殖子再感染另外的上皮细胞，并且这持续最多另外的四个4-6日的周期。最后，发育至有性阶段，其产生随粪便释放的卵囊。在环境中形成孢子后，重新开始周期(Shirley 等人, 2005, Adv. in Paras., vol. 60, p. 285)。

家禽中艾美球虫感染的症状不同，从食欲不振，到肠炎和血性腹泻(bloodydiarrhoea)，到由于肠中坏死组织的积累导致的器官衰竭，和甚至死亡。结果是饲料转化率的下降、降低的生长速率、降低的蛋产量和对继发性感染的易感性；这些全部都引起受影响的禽类的主要不适和对商业家禽操作的严重经济损害。对于家禽球虫病的概述，参见教科书例如：The Merck veterinary manual (第10版, 2010, C.M. Kahn编, ISBN:091191093X)，或：Swayne等人，编：“Diseases of Poultry”, 第13版, Wiley-Blackwell,Ames, IA., USA。

艾美球虫感染和球虫病的减少可以通过经由饲料施用抗球虫药物(抑球虫剂)来获得，但抗性的积累和动物产品中药物残留物的存在是持续关注的问题。因此，优选通过接种疫苗来防止家禽中的艾美球虫感染和相关的疾病体征。因为没有有效的亚单位艾美球虫疫苗或基于重组DNA的艾美球虫疫苗可用，对于家禽最多使用的是活疫苗，其包含来自一个或多个艾美球虫物种的形成孢子的卵囊。它们在禽肠道中的天然复制通过免疫系统的体液和细胞途径两者诱导强免疫。通常在接种疫苗后约3周达到完全免疫。在早期的单次活卵囊接种疫苗 – 通过后来偶尔的野生型加强感染帮助 - 足以保护禽类一生。

活的疫苗卵囊可以是野生型或减毒的致病型。一类特殊的减毒的艾美球虫是所谓的早熟株。此类减毒株产生更低数目的卵囊排出和/或对接种疫苗的靶标的肠的更少损害。

通常通过用毒性艾美球虫株攻击感染后评价感染和疾病的主要标准确定艾美球虫疫苗的效力，所述标准是：肠病变评分、活体重增加和卵囊排出。描述这些标准用于评价艾美球虫疫苗效力的相关性的文献是：Williams & Catchpole, (2000, Vaccine, vol.18, p. 1178-1185)。

通常，活的禽艾美球虫疫苗一般将含有来自几种艾美球虫物种的形成孢子的卵囊，因为免疫是物种特异性的。此外，不同的艾美球虫物种感染家禽的不同物种，例如鸡和火鸡。用于家禽的一些商业球虫病疫苗的实例是：Coccivac™、Paracox™或Fortegra™(全部MSD Animal Health)；Immucox™ (Ceva)；和Inovocox™ (Huvepharma)。