[发明专利]分子纳米标签

权利要求书

1.纳米级分子标签，包含：

(i) 直径30-80nm的芯纳米粒子，其中所述芯纳米粒子包括贵金属，所述贵金属为金或银，或其二者；

(ii) 可选地包围所述芯的壳，其中所述壳选自一层金、银、其二者，或者所述壳包括核酸分子或PEG；和

(iii) 具有第一部分和第二部分的包括单链DNA分子的装甲，其中所述第一部分包括硫代磷酸酯DNA，其将纳米粒子化合价降低到1个功能结合位点并结合于所述芯纳米粒子的表面，或如果存在的话，结合于所述壳的表面，而且所述第二部分不结合于所述芯纳米粒子或壳且包含具有1个结合位点的官能化末端，特征在于所述官能化末端包含能够特异性地结合于第二结合配偶体的第一结合配偶体并且其中所述第一和第二结合配偶体选自：

i) 苄基鸟嘌呤和SNAP-标签；

ii) 苄基鸟嘌呤和CLIP-标签；

iii) 生物素和链霉亲和素；

iv) 单链寡核苷酸和互补的单链寡核苷酸；

v) 单链寡核苷酸和适配体；

vi) DCFPyL和前列腺特异性膜抗原PMSA；

vii) 受体和配体；

viii) 配体和受体；

ix) 抗体和抗原；以及

x) 抗体和抗原；

其中所述芯、壳和装甲中的任一者或任何组合对可通过显微术或测量荧光和/或光散射强度或功率的装置检测的分子标签的荧光、光散射和/或配体结合性能有贡献；且

其中组分 (i) 和 (iii)，或者 (i)、(ii) 和 (iii)共同提供以下功能性：

(a) 其组装结构的光散射强度或功率在检测光散射强度或功率的装置的基准噪声的特定水平以上是可检测的；

(b) 荧光强度对装置检出限以上的检测而言具有足够的亮度；和/或

(c) 由配体结合组分赋予配体特异性。

2.根据权利要求1所述的纳米级分子标签，其中所述芯纳米粒子的直径为小于75nm或小于40nm。

3.根据权利要求1或2所述的纳米级分子标签，其中金纳米粒子是金纳米球。

4.根据权利要求1所述的纳米级分子标签，其中抗原是肿瘤抗原。

5.根据权利要求4所述的纳米级分子标签，其中所述肿瘤抗原包括PMSA、表皮生长因子受体EGFR、血管内皮细胞生长因子VEGF、HEE1、HER-2/neu、上皮细胞黏附分子EpCAM、CD20、CD24、CD25、CD33、CD52、CA125、Lewis Y、TAG72、CD133、CD47、CD147、PD-L1、GPC-1、CEA、甲胎蛋白AFP或Muc-1。

6.根据权利要求1所述的纳米级分子标签，其中所述抗体或配体对PMSA、EGFR、VEGF、HER1、Her-2/neu、EpCAM、CD20、CD24、CD25、CD33、CD52、CA125、Lewis Y、TAG72、CD133、CD47、CD147、PD-L1、GPC-1、CEA、AFP或Muc-1具有特异性。

7.根据权利要求4或5所述的纳米级分子标签，其中所述肿瘤抗原是PMSA，且所述纳米级分子标签包括抗-PSMA抗体，或PSMA配体DCFBC。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的纳米级分子标签用于制备采用流式细胞仪检测样品中单个靶分子的方法中的检测试剂的用途，该方法包括：

使样品接触权利要求1-7中任一项所述的纳米级分子标签，其中所述纳米级分子标签的官能化末端特异性地结合样品中的靶分子；和

使用测量光散射强度或功率的装置分析样品，其中所述装置被配置为用于分辨小粒子，以通过检测侧向散射或前向光扩散或检测荧光，或其任何组合来检测与靶分子结合的单个纳米级分子标签。

9.根据权利要求8所述的用途，其中在测量光散射强度或功率的装置中使用至少两个检测角度，在两个通道中，两个侧向散射通道来分析所述样品，其中第一侧向散射通道用作触发通道，且第二侧向散射通道用作检测通道。