[发明专利]针对正义链RNA病毒引起的感染性疾病的疫苗

说明书

本文描述了用于保护受试者免受由(+)SS RNA病毒引起的疾病的组合物。该组合物包含(i)含有可操纵地连接至真核RNA聚合酶启动子的编码感染性(+)SS RNA病毒的RNA分子的DNA的载体和载体材料；或(ii)从转染有(i)的载体的真核细胞获得的(+)SS RNA病毒和载体材料。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2016年11月28日提交的第62/426,708号美国临时申请的权益，通过引用将其全部内容并入本文。

技术领域

描述了用于保护受试者免受由正义单链RNA病毒引起的疾病的组合物。

背景技术

病毒是由遗传物质和蛋白质组成的较小的非细胞生物体。存在不同类型的病毒。例如，病毒可以是在宿主细胞核内复制的DNA病毒，或者是在细胞的细胞质中复制的RNA病毒。病毒可以是双链或单链的。此外，单链RNA病毒可以是正(+，有义)链或负(-)链的。这些不同类型的病毒引起多种病毒感染。

当病原性病毒侵入生物体机体时会发生病毒感染。病毒一旦进入就会通过以下方式进行复制：将自身附着到细胞上并对细胞重编程以复制新的病毒直到细胞破裂死亡，使得病毒能够迅速传播，从而引起人和动物中的各种感染性疾病。由病毒引起的感染性疾病包括普通感冒、流感和疣。然而，病毒还会引起严重的疾病，如艾滋病(AIDS)、小痘、疱疹、出血热、脊髓灰质炎、麻疹、腮腺炎和风疹。

疫苗已经被开发出来并且其已经成功地降低了脊髓灰质炎、麻疹、腮腺炎和风疹的发病率。常规的疫苗含有已经减毒过的活病毒。然而，由于这些病毒具有恢复更多致病表型的潜力并且在免疫受损宿主中可能是减毒不足的，因此需要开发在多种病毒系统中诱导持久免疫的安全的免疫原性疫苗。

近年来，已经开发出在体内产生减毒的活病毒的疫苗(Medigen公司)。许多RNA病毒的全长cDNA已被克隆至大肠杆菌质粒中以产生疫苗。然而，在许多情况下，难以制备这类质粒，因为全长病毒cDNA在大肠杆菌中通常是有毒的并且不能被大量制备。

发明内容

本文描述了包含编码感染性(+)SS RNA病毒的RNA分子的DNA的载体，所述DNA可操纵地连接至合适的启动子以在细胞(尤其是真核细胞)中表达。感染性(+)SS RNA病毒可以是由至少两种不同(+)SS RNA病毒的RNA序列编码的嵌合病毒。

本文还描述了通过将上述载体转染至真核细胞中获得的克隆纯化(+)SS RNA病毒同质群体。

本文描述了包含载体(vector)或克隆纯化(+)SS RNA病毒同质群体和载体材料(carrier)的组合物。还描述了包含载体(vector)和药学上可接受的载体材料(carrier)的药物组合物。

本公开还描述了包含载体的疫苗和包含克隆纯化(+)SS RNA病毒同质群体的疫苗。该疫苗的载体包含编码非病原性和/或减毒(+)SS RNA病毒的RNA分子的DNA。疫苗的克隆纯化(+)SS RNA病毒同质群体是非病原性和/或减毒的(+)SS RNA病毒。此外，本公开还描述了使用疫苗以将受试者免疫并保护受试者免受由感染性(+)SS RNA病毒引起的疾病的方法。

此外，本公开描述了使用本文描述的载体以制备疫苗并获得克隆纯化(+)SS RNA病毒同质群体的方法。此外，本公开描述了使用载体以获得转染有本文描述的载体的宿主细胞的方法。

附图说明