[发明专利]多能干细胞定向分化为HLA纯合免疫细胞的方法

权利要求书

1.产生HLA纯合免疫细胞的方法，包括：

(a)获得诱导多能干细胞(iPSC)，其中从HLA纯合血细胞群对iPSC进行重新编程；

(b)将iPSC分化为造血前体细胞(HPC)；和

(c)在促进免疫细胞分化的条件下培养HPC，从而产生HLA纯合免疫细胞。

2.权利要求1的方法，其中HLA纯合血细胞对于基因座等位基因HLA-A、HLA-B、HLA-C、HLA-DR、HLA-DP或HLA-DQ中的一种或多种是纯合的。

3.权利要求2的方法，其中HLA纯合血细胞对于基因座等位基因HLA-A、HLA-B、HLA-C、HLA-DR、HLA-DP或HLA-DQ中的两种是纯合的。

4.权利要求3的方法，其中HLA纯合血细胞对于HLA-A和HLA-B是纯合的。

5.权利要求2的方法，其中HLA纯合血细胞对于HLA-A、HLA-B和HLA-C是纯合的。

6.权利要求1的方法，其中HLA纯合免疫细胞是淋巴样细胞。

7.权利要求6的方法，其中淋巴样细胞是T细胞、B细胞和/或NK细胞。

8.权利要求1的方法，其中HLA纯合免疫细胞是骨髓样细胞。

9.权利要求8的方法，其中骨髓样细胞是树突细胞。

10.权利要求1的方法，其中HLA纯合血细胞群包含T细胞、B细胞和/或NK细胞。

11.权利要求8的方法，其中HLA纯合血细胞群进一步定义为祖血细胞、外周血单核细胞或淋巴母细胞。

12.权利要求1的方法，其中HLA纯合血细胞群是人。

13.权利要求8的方法，其中HLA纯合血细胞群分离自外周血、脐带血或淋巴样组织。

14.权利要求13的方法，其中淋巴样组织包括骨髓、淋巴结或胎肝。

15.权利要求8的方法，其中HLA纯合血细胞群包含T细胞。

16.权利要求15的方法，其中T细胞是CD4⁺ T细胞、CD8⁺ T细胞、T辅助性1(TH1)细胞、T辅助性2(TH2)细胞、TH17细胞、细胞毒性T细胞、调节性T细胞、自然杀伤T细胞、幼稚T细胞、记忆T细胞或γδT细胞。

17.权利要求1的方法，其中重新编程包括将重新编程因子引入HLA纯合血细胞群。

18.权利要求17的方法，其中重新编程因子由包含在重新编程载体中的一个或多个表达盒编码，所述重新编程载体选自病毒载体、附加体载体和转座子。

19.权利要求18的方法，其中病毒载体进一步定义为逆转录病毒载体。

20.权利要求18的方法，其中附加体载体进一步定义为基于Epstein-Barr病毒(EBV)的附加体载体。

21.权利要求1的方法，其中重新编程包括在确定的无饲养细胞条件下培养细胞。

22.权利要求1的方法，其中iPSC基本上不含整合的外源病毒元件。