[发明专利]使用低压双重梯度再集中的色谱分析

权利要求书

1.用于分离液体样品中的分析物的系统，所述系统包含：

·用于控制和调节所述系统的流速和压力的控制单元；

·用于将样品导入所述系统的入口；

·具有用于捕获分析物的吸着剂的第一柱，所述第一柱可在捕获模式与洗脱模式之间切换，所述捕获模式在入口与第一柱处于流体连通时启用，而所述洗脱模式在捕获在第一柱中的分析物被洗脱时启用；

·一个或多个并联连接并且由所述控制单元控制的流体泵，以便建立一个或多个流动相梯度并且以300nL/min至50μL/min的流速在1bar至50bar的压力下通过所述第一柱递送流动相，此时所述柱处于洗脱模式；

·一个或多个保持环路，其中可以储存流动相梯度和从第一柱中洗脱的部分分离的分析物用于进一步分离；

·一个或多个并联连接并且由所述控制单元控制的流体泵，以便以300nL/min至50μL/min的流速在1bar至50bar的压力下递送补充流量，所述补充流量在第一柱和保持环路之间被导入；和

·一个或多个可在低压位置和高压位置之间切换的阀，其中所述低压位置建立从第一柱到保持环路的流体连接，而所述高压位置建立与高压流体泵和通向色谱柱的导管的流体连接，其中所述控制单元适于激活高压流体泵并且强制所述环路中的梯度和分析物以20nL/min至20μL/min的流速和1bar至3,000bar的压力通过色谱柱。

2.权利要求1的系统，其中第一柱的内径是色谱柱内径的至少2倍大。

3.权利要求1或2的系统，其中色谱柱包含C18反相材料。

4.权利要求1-3任一项的系统，其中第一柱的吸着剂选自C18、C8、C4、hilic、SCX、SAX、纤维素、抗体及其衍生物。

5.用于分离液体样品中的分析物的系统，所述系统包含：

·用于控制和调节所述系统的流速和压力的控制单元；

·封装用于结合来自液体样品的分析物的吸着剂的一次性柱体；

·接受套，其用于接收所述柱体，并允许流动相通过所述柱体流入接受套，从而将分析物洗脱到接受套中；

·与接受套流体连通的导管，所述导管建立与保持环路的流体连接，所述保持环路中可以存储一个或多个流动相梯度和从所述柱体中洗脱的部分分离的分析物用于进一步分离；

·一个或多个并联连接并且由所述控制单元控制的流体泵，以任选地地建立一个或多个流动相梯度，并在1bar至50bar的压力下以300nL/min至50μL/min的流速通过所述柱体递送流动相；

·一个或多个并联连接并且由所述控制单元控制的流体泵，以任选地建立一个或多个梯度，并在1bar至50bar的压力下以300nL/min至50μL/min的流速递送补充流量，所述补充流量在接受套与保持环路之间被导入；和

·一个或多个可在低压位置和高压位置之间切换的阀，其中所述低压位置建立从所述柱体到保持环路的流体连接，而所述高压位置断开所述环路与低压位置的流体连接并建立与高压流体泵和通向色谱柱的第二导管的流体连接，其中所述控制单元适于激活高压流体泵并强制所述环路中的梯度和分析物以20nL/min至20μL/min的流速和1bar至3,000bar的压力通过色谱柱。

6.权利要求5的系统，其中所述柱体的内径是色谱柱内径的至少2倍大。

7.权利要求5或6的系统，其中所述柱体选自：

a.移液管尖端，其中包埋并固定有色谱树脂；

b.一段长度的管，其中它的内表面和/或外表面可以是圆柱形、圆锥形、球形或其任意组合；和

c.平面圆盘。

8.权利要求5-7任一项的系统，其中色谱柱包含C18反相材料。

9.权利要求5-8任一项的系统，其中所述柱体的吸着剂选自C18、C8、C4、hilic、SCX、SAX、纤维素、抗体及其衍生物。