[发明专利]从多能干细胞获得小胶质细胞的方法在审
申请号: | 201780066830.6 | 申请日: | 2017-09-01 |
公开(公告)号: | CN109963940A | 公开(公告)日: | 2019-07-02 |
发明(设计)人: | 斋藤弘树 | 申请(专利权)人: | 宝生物工程株式会社 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;A61K45/00;A61P21/02;A61P25/16;A61P25/28;G01N33/15;G01N33/50 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 初明明;周齐宏 |
地址: | 日本滋贺*** | 国省代码: | 日本;JP |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 多能干细胞 小胶质细胞 单核细胞 星形胶质细胞 胚胎 饲养细胞 祖细胞 血液 上清液 | ||
1.一种用于从多能干细胞产生小胶质细胞的方法,所述方法包括以下步骤:
(a) 将多能干细胞与饲养细胞共培养7天或更长时间以获得血液祖细胞的步骤,
(b) 将通过步骤(a)获得的所述血液祖细胞与饲养细胞在IL-3和/或GM-CSF存在下共培养以获得原始单核细胞的步骤,和
(c) 将通过步骤(b)获得的原始单核细胞与星形胶质细胞在M-CSF存在下共培养,或使用星形胶质细胞上清液在M-CSF存在下培养通过步骤(b)获得的原始单核细胞的步骤。
2.权利要求1的方法,其中步骤(a)的培养期为13天或更长时间。
3.权利要求1或2的方法,其中步骤(c)的特征为在IL-34存在下培养。
4.权利要求1-3中任何一项的方法,其中步骤(b)的特征为在IL-3和GM-CSF存在下培养。
5.权利要求1-4中任何一项的方法,其中所述饲养细胞为10T1/2细胞或OP9细胞。
6.权利要求1-5中任何一项的方法,其中步骤(a)的特征为在VEGF存在下培养。
7.权利要求1-6中任何一项的方法,其中所述多能干细胞为iPS细胞。
8.权利要求7的方法,其中所述iPS细胞来源于人类或小鼠。
9.一种用于其中涉及小胶质细胞的疾病的预防或治疗剂或者对于记忆或学习能力的改善剂的筛选方法,所述方法包括使用通过权利要求1-8中任何一项的方法产生的小胶质细胞。
10.权利要求9的筛选方法,其中涉及小胶质细胞的疾病为脊髓损伤、脑卒中引起的神经病、癫痫、神经性疼痛、血管闭塞性眼病、脱髓鞘病、精神病、脑梗塞、Nasu-Hakola病或神经变性疾病。
11.权利要求10的筛选方法,其中所述神经变性疾病为阿尔茨海默病、帕金森病或肌萎缩侧索硬化症。
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