[发明专利]肾素浓度的免疫学测定方法

说明书

本发明已成功取得一种与非活性型肾素相比，对活性型肾素显示更高的反应性的抗体。本发明成功开发出一种通过使用该抗体，即使在肾素抑制剂的存在下，测定值仍与肾素活性显示强相关性的免疫学测定方法。

技术领域

本发明是有关于一种对活性型肾素显示特异性的抗体、利用该抗体的肾素浓度的免疫学测定方法、包含该抗体的药剂、及包含该药剂的试剂盒。

背景技术

肾素是一种经由肾素-血管紧张素-醛固酮系统来进行血压调节的蛋白质，其活性在高血压或原发性醛固酮增多症等的诊断中为重要的指标。

因此，用来测定肾素活性或肾素浓度的方法的开发持续进行，目前在日本，检测利用血浆中的肾素使血管紧张素原分解所生成的血管紧张素-I的肾素活性测定方法已成主流(非专利文献1)。然而，此方法有肾素活性需取决于血浆中的血管紧张素原的浓度的问题。

另一方面，作为不受血管紧张素原浓度的影响的方法，亦有人利用检测活性型肾素的方法。活性型的成熟肾素是由肾素原(prorenin)所生成；而肾素原存在有封闭结构(日语：クローズ構造)与开放结构(日语：オープン構造)此2种方式，其中开放结构为活性型。因此，在活性型肾素的测定中，亦有人开发出能以免疫学方式测定成熟肾素与开放结构肾素原此两者的方法(非专利文献1)。

然而，此等使用于免疫学手法的抗体，甚而连因与肾素抑制剂结合而呈非活性化的成熟肾素或肾素原皆可识别(非专利文献2、3)，因此，在测定给药肾素抑制剂的患者的活性型肾素时，有测得的肾素浓度与肾素活性不显示相关性的问题。

[现有技术文献]

[非专利文献]

[非专利文献1]Campbell DJ et al.Clin Chem.2009May；55(5):867-77

[非专利文献2]Campbell DJ.Hypertension.2008Jan；51(1):15-8

[非专利文献3]Derkx FH.Clin Chem.1996Jul；42(7):1051-63

发明内容

发明所要解决的技术问题

本发明鉴于此种情况而完成，其目的在于提供一种方法，其为以免疫学方式测定肾素浓度的方法，即使在肾素抑制剂的存在下，测得的肾素浓度仍与肾素活性显示相关性。又，本发明亦以提供一种用于该测定的活性型肾素特异性抗体、包含该活性型肾素特异性抗体的药剂、及包含该药剂的试剂盒为目的。

用于解决问题的技术方案

本案发明人等为解决前述课题，而建构出以免疫学方式测定肾素抑制剂存在下的肾素浓度的系统，并针对选出的抗体，利用该系统来评定添加肾素抑制剂时的肾素浓度的测定值与肾素活性的关系。其结果，终于由所评定的多个抗体中成功鉴定出在肾素抑制剂存在下测定出的肾素浓度与肾素活性极相关的多个抗体。

所鉴定的抗体不仅在添加肾素抑制剂之一的阿利吉仑(Aliskiren)时，在添加其他的肾素抑制剂-肾素抑制剂III或VTP-27999时，测得的肾素浓度亦与肾素活性显示强相关性。此事实意味着：取得的抗体对未与肾素抑制剂结合而具有活性的肾素显示高反应性，另一方面对结合肾素抑制剂而呈非活性的肾素的反应性大幅降低。又，显示此种反应性的抗体可识别肾素上的共同的表位。

另外，就市售的抗体，如以往报导所述，对结合肾素抑制剂而呈非活性的肾素亦显示高反应性，而完全未看出测得的肾素浓度与肾素活性的相关性。

如此，本申请的发明人等于世界上首次成功开发出一种无论有无肾素抑制剂存在，对活性型肾素皆显示特异反应性的抗体，并成功利用该抗体，建构出测得的肾素浓度与肾素活性显示强相关性的免疫学测定方法，终至完成本发明。