[发明专利]用于产生免疫缀合物的方法有效
| 申请号： | 201780064030.0 | 申请日： | 2017-10-19 |
| 公开（公告）号： | CN109952370B | 公开（公告）日： | 2023-09-08 |
| 发明（设计）人： | I·戈尔;O·波普;A·施奈德 | 申请（专利权）人： | 豪夫迈·罗氏有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/02 | 分类号： | C12N5/02 |
| 代理公司： | 北京市中咨律师事务所 11247 | 代理人： | 张莉;黄革生 |
| 地址： | 瑞士*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 产生 免疫 缀合物 方法 | ||
1.通过在细胞培养基中培养含有一个或多个编码目的免疫缀合物的核酸的哺乳动物细胞、产生产物相关杂质和工艺相关杂质减少的免疫缀合物的方法，其中在细胞培养的条件下表达该一个或多个核酸，所述方法包括步骤：
-在细胞培养基中在第一温度和在第一pH培养哺乳动物细胞；
-降低细胞培养基的第一温度至第二温度；并升高细胞培养基的第一pH至第二pH；
-从细胞或细胞培养基回收免疫缀合物，
并且由此产生免疫缀合物,
其中第一温度是37℃+/-0.5℃并且第二温度处于28℃至34℃范围内；且
其中第一pH是pH 7+/-0.05pH单位并且第一pH升高0.25至0.4pH单位至第二pH。
2.根据权利要求1中所述的方法，其中方法还包括用一个或多个纯化步骤纯化免疫缀合物。
3.根据权利要求1所述的方法，其中降低至第二温度和升高至第二pH是在13至14天的总培养时间的2至9天后。
4.根据权利要求1所述的方法，其中降低至第二温度和升高至第二pH是在大约相同的时间。
5.根据权利要求1所述的方法，其中第一温度是37℃+/-0.5℃并且降低至29℃+/-0.5℃的第二温度。
6.根据权利要求1所述的方法，其中第二pH是7.25或更高。
7.根据权利要求1所述的方法，其中接种细胞密度是从约600000(6x105)至约1000000(1x 106)个细胞/ml。
8.根据权利要求1所述的方法，其中细胞培养基的重量摩尔渗透压浓度是从350mOsmol/kg+/-15mOsmol/kg至800mOsmol/kg+/-15mOsmol/kg。
9.根据权利要求1所述的方法，其中免疫缀合物是靶向CEA的IL-2免疫缀合物、靶向FAP的IL-2免疫缀合物、或IgG-IL-2免疫缀合物、或靶向FAP的4-1-BBL免疫缀合物。
10.根据权利要求1所述的方法，其中细胞培养物是补料分批细胞培养物。
11.根据权利要求1至10中任一项所述的方法，其中哺乳动物细胞是CHO细胞。
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