[发明专利]Ф6内部对照组合物、设备和方法

权利要求书

1.包含悬浮于在7-9的pH的适合于核酸扩增反应的缓冲液中的Ф6的组合物，其包含螯合剂和防腐剂。

2.权利要求1的组合物，其中所述缓冲液选自柠檬酸缓冲液、甘氨酸缓冲液、N-(三(羟甲基)甲基)甘氨酸缓冲液、PIPES或HEPES。

3.权利要求1或2任一项的组合物，其进一步包含一种或多种选自BSA、明胶、聚rA RNA、甘油、氨基酸、海藻糖、酪蛋白或聚乙二醇的额外组分。

4.权利要求1-3任一项的组合物，其中所述Ф6以最多到4e5拷贝/mL的浓度存在。

5.权利要求1-4任一项的组合物，其中所述螯合剂选自EDTA和EGTA。

6.权利要求1-5任一项的组合物，其中所述防腐剂选自叠氮化钠和ProClin 300。

7.权利要求1-6任一项的组合物，其包含

（a）在10 mM Tris，pH 8.0，0.1 mM EDTA，0.05％叠氮化钠和25 mg/mL BSA中最多到4e5cp/mL的Ф6；或

（b）在10 mM Tris，pH 8.0，0.1 mM EDTA，0.05％叠氮化钠和1％明胶中最多到4e5cp/mL的Ф6；或

（c）在10 mM Tris，pH 8.0，0.1 mM EDTA，0.05％叠氮化钠和20 mg/L聚rA RNA中最多到4e5cp/mL的Ф6；或

（d）在10 mM Tris，pH 8.0，0.1 mM EDTA，0.05％叠氮化钠，20 mg/L聚rA RNA和40％甘油中最多到4e5cp/mL的Ф6。

8.权利要求1-7任一项的组合物，其于45℃热稳定达最多到28天。

9.权利要求1-8任一项的组合物，其于30℃热稳定达最多到110天。

10.权利要求1-9任一项的组合物，其中在第0天的∆Ct于45℃≤5-7达最多到28天。

11.权利要求1-10任一项的组合物，其中在第0天的∆Ct在一个或多个冻融循环后≤5-7。

12.用于核酸扩增的方法，包括：

- 提供含有至少一种可扩增的靶核酸序列的核酸样品；

- 使所述核酸样品与根据权利要求1-11任一项的组合物接触；和

- 使用能够起始扩增反应的酶扩增所述靶核酸序列。

13.权利要求12的方法，其中所述核酸样品是RNA，并且该方法进一步包括

- 使用能够起始逆转录的酶逆转录所述靶核酸序列。

14.权利要求13的方法，其中使用能够起始逆转录和/或扩增反应的酶的组合或使用能够起始逆转录和扩增反应的酶来进行逆转录和扩增所述靶核酸序列。

15.权利要求12-14任一项的方法，其中Ф6噬菌体在定性和/或定量核酸检测中作为RNA标准物被逆转录和/或扩增。

16.设备，其被进行配置以在样品中进行核酸分析，所述设备包括

（a）适合于接收样品等分试样的样品引入端口；

（b）内部对照区室，其包含权利要求1-11任一项的组合物；和

（c）核酸分析区域，其包括一个或多个另外的区室，每个区室被进行配置以进行所述核酸分析的一个或多个步骤，包括试剂制备、靶富集、抑制剂去除、核酸提取、逆转录、扩增和实时检测。