[发明专利]纯化蛋白质的方法

权利要求书

1.一种在阳离子交换(CEX)色谱中以降低的聚集形成水平纯化感兴趣的蛋白质的方法，所述方法包括：

(a)提供包含感兴趣的蛋白质和一种或多种污染物的混合物；

(b)将混合物上样到偶联有精氨酸的CEX树脂上；和

(c)从树脂中洗脱感兴趣的蛋白质，

从而在CEX色谱中以降低的聚集形成水平纯化感兴趣的蛋白质。

2.权利要求1的方法，其中所述混合物包含澄清原液。

3.权利要求2的方法，其中所述澄清原液包括细胞培养上清液。

4.权利要求3的方法，其中所述上清液来自哺乳动物、细菌或真菌细胞培养物。

5.权利要求4的方法，其中所述上清液来自中国仓鼠卵巢(CHO)细胞培养物。

6.权利要求1的方法，其中所述污染物选自宿主细胞蛋白、宿主细胞代谢物、宿主细胞组成蛋白、核酸、内毒素、病毒、产物相关污染物、脂质、培养基添加剂和培养基衍生物。

7.权利要求1的方法，其中所述感兴趣的蛋白质选自抗体、抗体片段和Fc融合蛋白。

8.权利要求7的方法，其中所述感兴趣的蛋白质是Fc融合蛋白。

9.权利要求7的方法，其中所述抗体是单克隆抗体。

10.权利要求9的方法，其中所述单克隆抗体选自下组，该组的组成为：人抗体、人源化抗体和嵌合抗体。

11.权利要求1的方法，其中所述CEX树脂选自琼脂糖、纤维素、葡聚糖、壳聚糖、聚(甲基丙烯酸酯)、丙烯酸聚合物和聚(苯乙烯-二乙烯基-苯)。

12.权利要求1的方法，其中使用选自磺酸盐、羧酸、羧甲基磺酸、磺基异丁基、磺乙基、羧基、磺丙基、磺酰基、磺酰氧乙基(sulphoxyethyl)和正磷酸盐的阳离子交换配体制备所述CEX树脂。

13.权利要求1的方法，其中所述偶联有精氨酸的CEX树脂是精氨酸-磺丙基(Arg-SP)功能化树脂。

14.权利要求1的方法，其中通过选自蛋白A亲和色谱法和蛋白G亲和色谱法的亲和色谱法制备所述混合物。

15.权利要求14的方法，其中亲和色谱法是蛋白A亲和色谱法。

16.权利要求1的方法，其进一步包括一种或多种另外的色谱基质。

17.权利要求16的方法，其中所述一种或多种另外的色谱基质选自阴离子交换色谱、疏水相互作用色谱和混合模式色谱。

18.一种偶联有精氨酸的阳离子交换(CEX)树脂。

19.权利要求18的CEX树脂，其中所述CEX树脂选自琼脂糖、纤维素、葡聚糖、壳聚糖、聚(甲基丙烯酸酯)、丙烯酸聚合物和聚(苯乙烯-二乙烯基-苯)。

20.权利要求18的CEX树脂，其中使用选自磺酸盐、羧酸、羧甲基磺酸、磺基异丁基、磺乙基、羧基、磺丙基、磺酰基、磺酰氧乙基(sulphoxyethyl)和正磷酸盐的阳离子交换配体制备所述CEX树脂。

21.权利要求18的CEX树脂，其中所述偶联有精氨酸的CEX树脂是精氨酸-磺丙基(Arg-SP)功能化树脂。