[发明专利]工程化肉毒杆菌神经毒素

权利要求书

1.一种肉毒杆菌神经毒素(BoNT)多肽，其包含：

a)蛋白酶结构域；

b)蛋白酶裂解位点；

c)易位结构域；和

d)结合人SytII的肉毒梭状芽孢杆菌血清型B，菌株4的修饰的受体结合结构域(B4-H_c)。

2.如权利要求1所述的BoNT多肽，其中所述修饰的受体结合结构域包含取代突变V1113K、S1117P、S1196A和I1197P。

3.如权利要求2所述的多肽，其还包含对应于血清型B，菌株4中的取代突变的一个或多个取代突变，所述取代突变选自由以下组成的组：

Q1191C、Q1191V、Q1191L、Q1191Y、Q1191M、Y1199W、Y1199E、Y1199H、W1178Y、W1178Q、W1178A、W1178S、Y1183C、Y1183P及其组合。

4.如权利要求3所述的多肽，其中所述修饰的(B4-H_c)包含对应于血清型B，菌株4中的取代突变的两个取代突变，所述取代突变选自由以下组成的组：

Q1191C、Q1191V、Q1191L、Q1191Y、Q1191M、Y1199W、Y1199E、Y1199H、W1178Y、W1178Q、W1178A、W1178S、Y1183C和Y1183P。

5.如权利要求2所述的多肽，其包含肉毒梭状芽孢杆菌血清型B，菌株4的修饰的受体结合结构域(B4-H_c)，所述多肽还包含对应于血清型B，菌株4中的取代突变的两个或更多个取代突变，其中所述取代突变中的一个选自由Q1191M、Q1191C、Q1191V、Q1191L和Q1191Y组成的组。

6.如权利要求2所述的多肽，其还包含对应于血清型B，菌株4中的取代突变的两个或更多个取代突变，其中所述取代突变中的一个对应于血清型B，菌株4中的Y1199W、Y1199E、Y1199H、W1178Y、W1178Q、W1178A、W1178S、Y1183C、Y1183P、Y1199F或Y1199L。

7.如权利要求2所述的多肽，其还包含两个取代突变，所述取代突变选自对应于血清型B，菌株4中的Q1191M和W1178Q、Q1191C和W1178Q、Q1191V和W1178Q、Q1191L和W1178Q、Q1191Y和W1178Q、Q1191M和Y1183P、Q1191M和Y1183C、Q1191C和Y1183P、Q1191C和Y1183C、Q1191V和Y1183P、Q1191V和Y1183C、Q1191L和Y1183P、Q1191L和Y1183C、Q1191Y和Y1183P、Q1191Y和Y1183C、W1178Q和Y1183P以及W1178Q和Y1183C的取代突变。

8.如权利要求5所述的多肽，其中所述两个取代突变对应于血清型B，菌株4中的Q1191M和W1178Q。

9.如权利要求5所述的多肽，其中所述两个取代突变对应于血清型B，菌株4中的Q1191M和W1183P。

10.如权利要求5所述的多肽，其中所述两个取代突变对应于血清型B，菌株4中的Q1191M和W1183C。

11.如权利要求2所述的多肽，其中所述修饰的(B4-H_c)还包含三个取代突变。

12.如权利要求11所述的多肽，其中所述三个另外的取代突变在对应于血清型B，菌株4的Q1191、W1178和Y1183的位置处。

13.如权利要求11所述的多肽，其中所述三个另外的取代突变对应于血清型B，菌株4的Q1191M、W1178Q和Y1183P。