[发明专利]用于去除抑制性组分的方法

说明书

本发明涉及一种用于检测诊断样品中一种或更多种疾病相关组分的存在的体外方法，所述诊断样品包含选自由分泌的体液、排泄的体液和脑脊液组成的组的生物流体。该方法包括以下步骤：a)使所述样品与固相接触，所述固相具有缀合至其至少一部分的一种或更多种配体，所述配体对所述样品中存在的一种或更多种抑制性组分具有亲和力并且能够与其结合；b)允许所述一种或更多种抑制性组分结合至所述固相上存在的一种或更多种配体，从而减少所述样品中所述一种或更多种抑制性组分的量；以及其后c)检测所述诊断样品中一种或更多种疾病相关组分的存在。所述一种或更多种抑制性组分的特征为能够与步骤c)中的检测结合并且干扰步骤c)中的检测。

发明领域

本发明涉及诊断免疫测定领域，并且更具体地，涉及诊断免疫测定灵敏度的改进。

发明背景

免疫测定被广泛地用作用于通过抗原与抗体的反应来测量溶液中分子的浓度或存在的生物化学测试。分析通过测量标记物活性例如辐射、荧光或酶活性来实现。

一个重要的应用是疾病的诊断，其中免疫测定被用于检测生物流体中小浓度的疾病相关分子。作为实例，结核病(TB)是一种多层面的疾病，并且在工业化国家和发展中国家两者中均是有挑战性的公共健康问题，使全世界每年死亡300万人。根据世界卫生组织(theWorld Health Organisation)，约三分之一的世界人口感染有结核分枝杆菌复合群(mycobacterium tuberculosis complex)的细菌，并且结核病占所有可避免的成人死亡的26％，这使得它成为最常见的致命性传染性疾病。因此，TB的有效控制要求破坏传播链，这继而要求早期且精确的检测，随后是立即治疗。

尽管诸如结核病、疟疾、HIV的传染性疾病的巨大的全球负担，但用于活动性疾病的诊断的目前测试是不充分的并且具有严重的限制。因此，对用于改进诊断测试的灵敏度和精确度的方法存在需求。

发明概述

以上呈现的问题现在通过提供一种新颖的方法、一种固相和一种试剂盒已经被克服或至少被缓解，所述固相和试剂盒包含缀合至所述固相的能够从体液中去除抑制剂的一种或更多种配体。

作为本发明的第一方面，提供了一种用于检测诊断样品中一种或更多种疾病相关组分的存在的体外方法，所述诊断样品包含选自由分泌的体液、排泄的体液和脑脊液组成的组的生物流体，所述方法包括以下步骤：

a)使所述样品与固相接触，所述固相具有缀合至其至少一部分的一种或更多种配体，所述配体对所述样品中存在的抑制性组分具有亲和力并且能够与所述样品中存在的抑制性组分结合；

b)允许所述一种或更多种抑制性组分结合至所述固相上存在的一种或更多种配体，从而减少所述样品中所述一种或更多种抑制性组分的量；以及其后

c)检测所述诊断样品中一种或更多种疾病相关组分的存在，

其中所述一种或更多种抑制性组分的特征为能够与步骤c)中的检测结合并且干扰步骤c)中的检测。

本发明基于以下认识：若干种体液包含可以在免疫测定中阻断可检测复合物的形成的抑制剂。因此，本发明人已经发现抑制性组分的存在负面地影响免疫测定的测试性能。因此，抑制剂的存在可能导致没有信号是可见的或被记录，并且因此即使样品包含靶抗原，样品也可能被认为是阴性的。为了克服此问题并逆转回损失的信号，本发明人已经发现减少此类抑制剂的浓度的方式，这可以在随后的免疫测定中导致更高的灵敏度。

在本公开内容的上下文中，抑制性组分可以包括蛋白和碳水化合物的混合物。例如，抑制性组分可以具有约5kDa-1000kDa的分子量。在本发明的所有方面中，抑制性组分可以包括至少一种蛋白，例如至少一种糖蛋白。