[发明专利]乙型肝炎治疗型疫苗

权利要求书

1.一种融合蛋白，其包含：

(a)抗原呈递细胞(APC)结合域或CD91受体结合域，其位于所述融合蛋白的N端；

(b)蛋白转导域，位于所述APC结合域或CD91受体结合域的C端，其中所述蛋白转导域为融合多肽，其包含：

(1)T细胞致敏信号转导肽，在长度上由28-53个氨基酸残基所组成，且包含SEQ ID NO:28的氨基酸序列，其中Xaa⁸为I或L，Xaa¹⁰为V、F或A，Xaa¹¹为M或L，Xaa¹⁷为L或I，位于所述融合多肽的N端；

(2)转位肽，在长度上由34-112个氨基酸残基所组成，且包含与SEQ ID NO:3、4、20或30至少90％同一性的氨基酸序列；以及

(3)连接肽，其连接所述T细胞致敏信号转导肽及所述转位肽；以及

(c)抗原，其包含乙型肝炎病毒X蛋白缺失突变体(△HBx)，其缺乏X蛋白的至少第21-50位的氨基酸残基，所述抗原位于所述蛋白转导域的C端。

2.如权利要求1所述的融合蛋白，其中所述APC结合域或CD91受体结合域包含氨基酸序列，其与选自由SEQ ID NO:5、9、6、7及8所构成的群组的氨基酸序列至少90％相同。

3.如权利要求1所述的融合蛋白，其进一步包含位于所述融合蛋白的C端的内质网滞留序列。

4.如权利要求1所述的融合蛋白，其中如果所述抗原含有10个或10个以上抗原表位，则所述融合蛋白在C端不包含内质网滞留序列。

5.如权利要求1所述的融合蛋白，其中所述蛋白转导域包含SEQ ID NO:27的氨基酸序列。

6.如权利要求1所述的融合蛋白，其中所述APC结合域或CD91受体结合域包含选自由SEQ ID NO:5、9、6、7及8所构成的群组的氨基酸序列。

7.如权利要求1所述的融合蛋白，其中所述T细胞致敏信号转导肽包含选自由SEQ IDNO:1及2所构成的群组的氨基酸序列。

8.如权利要求1所述的融合蛋白，其中所述转位肽包含SEQ ID NO:3的氨基酸序列。

9.如权利要求1所述的融合蛋白，其中所述抗原包含SEQ ID NO:23的氨基酸序列。

10.如权利要求1所述的融合蛋白，其中所述缺失突变体△HBx具有第1-50位、第5-50位、第10-50位、第15-50位，或第18-50位的氨基酸缺失。

11.一种疫苗组合物，包含：

(a)具有治疗有效剂量的如权利要求1所述的融合蛋白，以及

(b)佐剂。

12.如权利要求11所述的疫苗组合物，其中所述佐剂包含CpG寡核苷酸。

13.一种如权利要求1所述的融合蛋白用于制备医药品的用途，所述医药品用于诱发乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)特异性T细胞反应、治疗乙型肝炎病毒感染、将乙型肝炎病毒感染症状降至最低程度、抑制乙型肝炎病毒于肝脏细胞内增生，和/或抑制需治疗个体的乙型肝炎病毒感染。

14.一种用于制备乙型肝炎病毒X蛋白缺失突变融合蛋白的方法，其包含：

(a)产生质粒，其用于表达如权利要求1所述的融合蛋白；

(b)使所述质粒于宿主细胞内表达所述融合蛋白；以及

(c)自所述宿主细胞收集所述融合蛋白。

15.如权利要求1至10中任一项所述的融合蛋白，其中所述蛋白转导域包含SEQ ID NO:22的氨基酸序列。