[发明专利]被玻璃化保存的生殖细胞的融解用器具及融解方法

说明书

为了提供同时实现高受胎率及移植作业的容易化的被玻璃化保存的生殖细胞的融解用器具及融解方法，融解用器具(1)具备载置器具(8)、管(5)及保冷器具(6)，在管(5)内设置(i)收纳载置器具(8)且被保冷器具(6)覆盖的生殖细胞收纳区域(10)、和(ii)收纳融解液的融解液收纳区域(11)，载置器具(8)与已融解的融解液接触。

技术领域

本发明涉及被玻璃化保存的生殖细胞的融解用器具及融解方法。

背景技术

在畜产领域，作为使目标哺乳动物增产的技术，已知有向哺乳动物的生殖器内移植胚胎的技术(胚胎移植技术)。为了实现更好的胚胎移植技术，目前，正在进行着眼于将胚胎冷冻保存的方法和/或将冷冻的胚胎融解的方法等的胚胎移植技术的开发。

作为胚胎移植技术的一个例子，已知有使用急速冷却而被玻璃化保存的胚胎的方法(超急速玻璃化保存法)。在该方法中，在培养皿内将胚胎与玻璃化液混合后，通过将包含胚胎的玻璃化液载置到板状器具上并浸到液氮中的方法等将胚胎急速冷却，从而将胚胎进行玻璃化保存。而且，在将胚胎用于移植时，通过将载置有被玻璃化保存的胚胎的板状器具浸渍到融解液中，从而急速加温并将被玻璃化保存的胚胎融解。因此，在超急速玻璃化保存法中，不是在屋外、而是需要在无菌的环境即研究室内进行一连串的作业。

作为胚胎移植技术的另一个例子，如专利文献1及2中所示的那样，已知有使用麦管内的被玻璃化保存的胚胎的方法(麦管内玻璃化保存法)。在该方法中，在麦管内，将被玻璃化保存的胚胎融解，从该麦管中直接将胚胎移植到目标哺乳动物中。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本公开专利公报“特开2014-143950号公报(2014年8月14日公开)”

专利文献2：日本公开专利公报“特开2014-184056号公报(2014年10月2日公开)”

发明内容

发明所要解决的课题

然而，在上述那样的现有技术中，存在无法同时实现高受胎率、及移植作业的容易化的课题。

例如，超急速玻璃化保存法虽然能够提高受胎率，但另一方面，不是在屋外、而是需要在无菌的环境即研究室内进行一连串的作业，存在移植作业变得繁杂的课题。

另一方面，麦管内玻璃化保存法虽然能够将移植作业容易化，但另一方面，存在将胚胎进行玻璃化保存并保管到麦管内的作业繁杂、并且存活率及受胎率低的课题。

本发明是鉴于上述的问题而进行的，其目的在于提供同时实现高受胎率、及移植作业的容易化的被玻璃化保存的生殖细胞的融解用器具及融解方法。

用于解决课题的手段

在将生殖细胞进行玻璃化保存时、及将被玻璃化保存的生殖细胞融解时，生殖细胞受到2个损伤，其结果是，移植该生殖细胞时的受胎率降低。损伤之一是在大概-130℃的温度下生殖细胞中产生的损伤，是由于冰晶的龟裂而产生的损伤(破裂损伤)。另一个损伤是在大概-80℃的温度下生殖细胞中产生的损伤，是由于脱玻璃化后的冰晶形成而产生的损伤。

本发明人们鉴于上述课题进行了深入研究，结果发现，若将被玻璃化的生殖细胞配置在管内，在抑制该生殖细胞的温度变化并保持在低温的状态下，使配置在该管内的融解液变化为适于生殖细胞融解的状态(例如由冷冻状态变化为融解状态)，之后，使该融解液与生殖细胞快速接触，则不仅能够降低生殖细胞中产生的损伤而达成高受胎率，而且通过从安装于移植用器具上的该管将生殖细胞直接移植到动物中能够使移植作业容易化，从而完成本发明。