[发明专利]干燥烟草材料的生产方法

权利要求书

1.一种增加了苏氨酸含量的干燥烟草材料的生产方法，该方法包括：

从改变为内源性的苏氨酸醛缩酶的表达或活性降低的烟草植物或其一部分生产该干燥烟草材料，其中，

该苏氨酸醛缩酶为以下(a)及(b)中的至少任一者：

(a)包含由下述基因编码的多肽的苏氨酸醛缩酶，所述基因包含相对于具有序列号1中记载的碱基序列的多核苷酸具有90％以上序列同一性的多核苷酸，

(b)包含由下述基因编码的多肽的苏氨酸醛缩酶，所述基因包含相对于具有序列号3中记载的碱基序列的多核苷酸具有90％以上序列同一性的多核苷酸，

所述干燥烟草材料中的苏氨酸含量的增加是由于所述经过改变的烟草植物或其一部分的干燥而产生的。

2.根据权利要求1所述的生产方法，其中，所述经过改变的烟草植物中内源性的苏氨酸醛缩酶的表达或活性降低是由编码该苏氨酸醛缩酶的基因的突变等位基因引起的、或者是由导入的用于抑制该苏氨酸醛缩酶的表达的外源性的多核苷酸引起的。

3.根据权利要求2所述的生产方法，其中，所述突变等位基因包含选自插入、缺失、移码突变、无义突变、无终止密码子突变(nonstop mutation)、及剪接位点突变中的突变。

4.根据权利要求3所述的生产方法，其中，所述突变是包含人工突变的突变、或者是包含天然存在的自然突变的突变，所述人工突变是利用选自突变诱导、基因组编辑及敲除法中的方法导入的。

5.根据权利要求4所述的生产方法，其中，所述人工突变是通过突变诱导或基因组编辑导入的，该突变诱导或基因组编辑通过选自暴露于化学物质或放射线、CRISPR系统、转录激活因子样效应物核酸酶(Transcription Activator-Like Effector Nucleases)、锌指核酸酶(Zinc Finger Nucleases)、寡聚核苷酸定点诱变(Oligonucleotide-directedmutagenesis)、T-DNA插入、及转座子插入中的方法进行。

6.根据权利要求2所述的生产方法，其中，作为编码所述苏氨酸醛缩酶的基因，所述经过改变的烟草植物是等位基因彼此具有相同种类的突变的纯合体、或者是等位基因彼此具有不同突变的杂合体。

7.根据权利要求2所述的生产方法，其中，所述外源性的多核苷酸包含选自反义RNA分子、RNAi分子及共抑制因子分子中的分子。

8.根据权利要求1所述的生产方法，其中，所述经过改变的烟草植物是通过改变为内源性的苏氨酸醛缩酶的表达或活性降低的烟草植物的自身繁殖而培育成的烟草品种的植物、或者是通过该经过改变的烟草植物彼此交配而培育成的烟草品种的植物。

9.根据权利要求8所述的生产方法，其中，所述经过改变的烟草植物是基于选自以下(a)～(e)中的指标而筛选及培育成的烟草植物：

(a)所述苏氨酸醛缩酶的表达的降低，

(b)所述苏氨酸醛缩酶的活性的降低，

(c)加热处理后的叶中的苏氨酸含量的增加，

(d)有无所述苏氨酸醛缩酶的突变等位基因，

(e)与所述(d)的突变等位基因连锁的DNA标记物，

(f)有无为了抑制所述苏氨酸醛缩酶的表达而导入的外源性的多核苷酸。

10.根据权利要求1所述生产方法，其中，所述烟草植物的一部分选自叶、根、茎、腋芽、花、种子、植物培养细胞、愈伤组织及原生质体。

11.根据权利要求1所述的生产方法，其中，所述干燥通过选自热风干燥、空气干燥、火烘干及日晒干燥中的干燥来进行。

12.根据权利要求1所述生产方法，其中，所述经过改变的烟草植物是选自烟草(Nicotiana tabacum)及黄花烟草(Nicotiana rustica)中的烟草植物。