[发明专利]用于化合物的羟基化的生物催化剂和方法

权利要求书

1. 一种工程化多肽，所述工程化多肽具有脯氨酸羟化酶活性，其中所述工程化多肽的氨基酸序列与序列SEQ ID NO:4之间的残基差异为C43A、M151G/H/Q/R、F176V，以及选自以下的1-5个残基差异：L45C、V58M、K71I、E114K/H/R、E115P、G128A/E/T、L165F/Y、A173R、D237A/K/C/T/S、G270R、E273V。

2. 一种工程化多肽，所述工程化多肽具有脯氨酸羟化酶活性，其中所述工程化多肽的氨基酸序列与序列SEQ ID NO:4之间的残基差异为L76V、M151R/N/T、F176V，以及选自以下的1-6个残基差异：R15C、C43A、L45C、R48I、G50A、I56R、V57I、V58M、A62C、P63F/L/V/H/I、K71C/V/I、S87C/W、R88W、V92C、L119A、D124H、G128A/E/H/T/Y、E134Q、K136R、I145C、S160E/R、L165Y。

3. 一种工程化多肽，所述工程化多肽具有脯氨酸羟化酶活性，其中所述工程化多肽的氨基酸序列与序列SEQ ID NO:4之间的残基差异为S30T/R、L76V、M151R/T、F176V，以及选自以下的1-4个残基差异：V44P、V57I、A62C/F、K71C/V、G128A/Y、I145C、S160E、G270V、Y280F。

4. 一种工程化多肽，所述工程化多肽具有脯氨酸羟化酶活性，其中所述工程化多肽的氨基酸序列与序列SEQ ID NO:4之间的残基差异为L76V、M151R/T/N、S160R、F176V，以及选自以下的1-6个残基差异：S30R/T、C37I、K39R、C43A、I56R、V58M、A62C、A101G、K136N/R、L165Y、E178C、F180Y、V184F、I213E、S240H、A256D、S263E/D、R266Q、R274P/Y、G275A、Y280L。

5. 一种工程化多肽，所述工程化多肽具有脯氨酸羟化酶活性，其中所述工程化多肽的氨基酸序列与序列SEQ ID NO:4之间的残基差异为S30R/A/E/N/T/V/G、C37I/L、L76V、M151R、S160R、F176V，以及选自以下的1-5个残基差异：H4P、S33T、K39P/T、Q52P、D55E、V58T、N61D、A62E/R/G/T、I94L、V95I、V97A、S98P、S107A/M、Y109F、E114G/N/Q/S、E115G/C、L119V、D124E、A130L、H271Q、V277E/K/R/M。

6. 一种工程化多肽，所述工程化多肽具有脯氨酸羟化酶活性，其中所述工程化多肽的氨基酸序列与序列SEQ ID NO:4之间的残基差异为S30R、C37I、M151R/G、S160R/C、F176V，以及选自以下的1-2个残基差异：D55E/S、V57A/L/T、V58L/S/Y/C/H/N/T、L76V、V97A、S107A/M、Y109F、E115C/G、A156S、V277E/K/M/R。

7. 一种工程化多肽，所述工程化多肽具有脯氨酸羟化酶活性，其中所述工程化多肽的氨基酸序列与序列SEQ ID NO:604之间的残基差异为R30N、A62D/E，以及选自以下的1-6个残基差异：A57V、N61D、L76V、A97V、E114K/N/S、E273G/T、H271R/W。

8. 一种工程化多肽，所述工程化多肽具有脯氨酸羟化酶活性，其中所述工程化多肽的氨基酸序列与序列SEQ ID NO:604之间的残基差异为R30N、A62D、E114S、E273T、H271W，以及选自以下的1-4个残基差异：S24T、S72V、S127T/R、K161G、A173Y、E178R、V184L、Q186R、P187H、V188I、E185V、Q186G、T189I/H/P、D192W、M193I、G207R、G210M、S240I/Q、S263G、H271W。