[发明专利]用于将RNA转移到尤其参与免疫应答的细胞中的病毒颗粒

权利要求书

1.逆转录病毒颗粒，其包含来自Gag多蛋白的蛋白、包膜蛋白、任选的整合酶和至少两种衣壳化的非病毒RNA，衣壳化的非病毒RNA每种包含与衣壳化序列结合的目标RNA序列，每种衣壳化序列由被引入到来自Gag多蛋白的蛋白中和/或整合酶中的结合结构域识别，并且衣壳化的非病毒RNA的所述目标序列的至少一个包含编码至少一个表位的部分和/或至少一种特异性识别表位的分子结构。

2.根据权利要求1所述的逆转录病毒颗粒，其包含核衣壳蛋白，包膜蛋白，任选的整合酶和至少两种衣壳化的非病毒RNA，所述衣壳化的非病毒RNA各自包含与衣壳化序列结合的目标RNA序列，每种衣壳化序列通过被引入到核衣壳蛋白中和/或整合酶中的结合结构域识别。

3.根据权利要求2的逆转录病毒颗粒，其中所述至少两种衣壳化的非病毒RNA的目标序列是相同的。

4.根据权利要求2的逆转录病毒颗粒，其中所述至少两种衣壳化的非病毒RNA通过它们的RNA序列区分。

5.根据权利要求4的颗粒，其中其它衣壳化的非病毒RNA的目标序列编码免疫调节蛋白。

6.根据权利要求3至5中任一项所述的逆转录病毒颗粒，还包含第三衣壳化非病毒RNA。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的逆转录病毒颗粒，其中所述至少一种表位和/或至少一种特异性识别表位的分子结构是免疫原性的。

8.根据权利要求2至7中任一项的逆转录病毒颗粒，其中结合结构域被引入到核衣壳蛋白中，并且第二结合结构域能够被引入核衣壳和/或整合酶中。

9.根据权利要求1至7中任一项的逆转录病毒颗粒，其中结合结构域被引入到整合酶中，并且第二结合结构域能够被引入到核衣壳和/或整合酶中。

10.根据权利要求2至9中任一项的逆转录病毒颗粒，其是慢病毒颗粒。

11.根据权利要求10的慢病毒颗粒，其中：

- 结合结构域是MS2噬菌体的“外壳”蛋白的序列，

- 非病毒RNA的衣壳化序列是MS2的茎-环序列，

- 核衣壳蛋白是属于Gag多蛋白的HIV的核衣壳蛋白(NC)，所述NC在第二个锌指处突变以插入MS2噬菌体的“外壳”蛋白的序列。

12.根据权利要求10的慢病毒颗粒，其中：

- 结合结构域是PP7噬菌体的“外壳”蛋白的序列，

- 非病毒RNA的衣壳化序列是PP7茎-环序列，

- 核衣壳蛋白是属于Gag多蛋白的HIV的核衣壳蛋白(NC)，所述NC在第二锌指处突变以插入PP7噬菌体的“外壳”蛋白的序列。

13.包含根据权利要求1至12中任一项的颗粒的组合物。

14.用于生产根据权利要求1至12中任一项所述的颗粒的试剂盒，其包括：

(i) 包含至少一个目标序列的表达质粒，其中在该序列的上游或下游插入衣壳化序列，

(ii) 编码来自嵌合Gag多蛋白的蛋白和/或整合酶的衣壳化质粒，其包含允许识别衣壳化序列的结合结构域，和

(iii) 编码包膜蛋白的包膜质粒。

15.根据权利要求14所述的生产试剂盒，还包含第二种衣壳化质粒，其编码：

- 来自野生型Gag多蛋白的蛋白，当第一种衣壳化质粒编码来自嵌合Gag多蛋白的蛋白时，和/或

- 野生型整合酶，当第一种衣壳化质粒编码嵌合整合酶时。