[发明专利]编码传染性喉气管炎病毒和传染性法氏囊病病毒抗原的重组非致病性马立克氏病病毒构建体

说明书

本发明公开了新型重组多价非致病性马立克氏病病毒构建体及以及在家禽疫苗中使用它们的方法，所述构建体编码并表达传染性喉气管炎病毒蛋白抗原和传染性法氏囊病病毒蛋白抗原二者。

相关申请的交叉引用

本申请在35 U.S.C. § 119(e)下要求于2016年6月17日提交的美国临时申请序号62/351,471的优先权，其内容通过引用以其整体并入本文。

发明领域

本申请涉及编码并表达传染性喉气管炎病毒(Infectious LaryngotracheitisVirus)和传染性法氏囊病病毒(Infectious Bursal Disease Virus)蛋白抗原的新型重组多价非致病性马立克氏病病毒(Marek's Disease virus)构建体，以及在家禽疫苗中使用它们的方法。

发明背景

致病性家禽病毒不仅使鸡虚弱，而且它们还对鸡饲养者造成严重损失，因为大多数的所致疾病是传染性的，并且家禽工业严重依赖于封闭的大规模饲养设备。接种幼鸡常常是对抗这些病毒的唯一可行手段。尽管减毒或灭活的家禽病毒疫苗在市场中仍是重要的，近年来，在开发包含表达致病性病毒蛋白抗原的重组病毒构建体的疫苗上已花费了大量资源。此外，已进行大量努力以构建表达来自多种病毒病原体的外源基因的、稳定且有效的多价重组非致病性马立克氏病病毒(缩写为rMDV_np)载体。这样的多价疫苗将用于使给予小鸡的注射次数最小化，并且由此减少接种的小鸡的不适和应激，并且显著降低劳力和材料成本。使用这样的单一多价构建体接种还将优于包含多个重组单价rMDV_np构建体的替代多价rMDV_np疫苗，因为至少迄今为止，这些替代疫苗产生仅针对单一病毒病原体的保护作用。这样的替代疫苗的失败可能是由于单价rMDV_np构建体之一生长超过其它单价rMDV_np构建体，从而阻止这些其它单价rMDV_np构建体诱导显著的免疫反应。在任何情况下，尽管过去确实进行了大量努力以构建表达来自多种病毒病原体的外源基因的、稳定且有效的多价rMDV_np载体，这种疫苗在超过二十年前已被建议[参见例如，U.S. 5,965,138]，但仅在最近，包含编码来自超过一种其它病原体的抗原的重组火鸡疱疹病毒(缩写为rHVT)的多价疫苗才显示出既稳定又有效。

可通过接种控制的一种家禽病毒疾病是马立克氏病。马立克氏病是在全世界不利地影响鸡的致病性疾病。马立克氏病主要发生在2至5月龄的幼鸡中。临床体征包括：肢体中的一个或多个的进行性麻痹，由于腿的麻痹而导致的动作失调，由于累及翅膀而导致的翼下垂，以及由于累及颈部肌肉而导致的头位置降低。在急性病例中，可产生严重的萎靡不振。还可发生法氏囊和胸腺萎缩。

马立克氏病的病原体是马立克氏病病毒血清型1(缩写为MDV1)，即一种具有双链DNA基因组的细胞相关病毒。MDV1是嗜淋巴细胞的禽α疱疹病毒（avianalphaherpesvirus），其：(i)感染B细胞，这可导致细胞溶解，并且(ii)潜伏地感染T细胞，这可诱导T细胞淋巴瘤。与毒性MDV1株密切相关的马立克氏病病毒血清型2(缩写为MDV2)，此前称作Gallid疱疹病毒3，是天然的减毒MDV株，其已显示在鸡中具有极低的或没有致病性[Petherbridge 等人，J. Virological Methods 158:11-17 (2009)]。SB-1是特定的MDV2株，其已显示可用于针对MDV1的疫苗中[参见例如，Murthy and Calnek，Infection andImmunity 26(2) 547-553 (1979)]。