[发明专利]膜联蛋白的核心结构域及其在抗原递送和接种中的用途

说明书

本公开提供了例如疫苗(包括DNA疫苗)的免疫原性组合物及其用途，例如，其包括膜联蛋白核心结构域以用于介导有效的抗原递送和抗原呈递从而诱导抗原特异性免疫应答，和/或治疗或预防传染病和/或癌症。

本公开提供了免疫原性组合物(例如疫苗，包括DNA疫苗)及其用途，例如，其包括膜联蛋白核心结构域用于介导有效的抗原递送和抗原呈递，以诱导抗原特异性免疫应答，和/或治疗或预防传染病和/或癌症。

发明背景

启动适应性免疫应答的核心是专职抗原呈递细胞(APC)，其展示与其细胞表面上的I类和II类MHC复合物结合的抗原衍生肽(Verboogen，Dingjan等人，2016)。虽然胞质蛋白被蛋白酶体降解并加载到CD8+T细胞识别的I类MHC复合物上，但外源蛋白(例如来自吞噬细菌或凋亡细胞)的吞噬导致核内体/溶酶体降解并呈递在能呈递至CD4+T细胞的II类MHC复合物上。此外，诸如树突细胞(DC)的APC能够使来自吞噬蛋白的肽也穿梭到I类MHC途径中以被呈递给CD8+T细胞，该过程被称为交叉呈递(Segura和Amigorena 2015)。在所描述的用于实现APC-样功能的不同细胞类型中，DC被认为是最有效的(Kambayashi和Laufer 2014)。在APC:T细胞相互作用之后，T细胞受体(TCR)衔接导致初始T细胞活化(引发)，以例如细胞因子如白细胞介素(IL)-2和干扰素-γ的分泌为特征(Grakoui，Bromley等人，1999)。活化的T细胞将继续分裂并分化成不同类型的效应T细胞，其可被分为两个主要谱系：CD4+T辅助细胞(Th)和CD8+细胞毒性T细胞。细胞毒性T细胞直接诱导靶细胞凋亡，而Th细胞通过产生细胞因子引导免疫应答，并且已被分类为Th1，Th2和Th17主要亚群(Lutz 2016)。总结它们的效应功能，Th1细胞是激活细胞免疫所必需的，而Th2细胞诱导体液免疫反应。Th17细胞被认为参与针对细胞外病原体如真菌的免疫。关于抗肿瘤免疫应答，有效CD8+T细胞应答的诱导被认为是肿瘤排斥的关键，并且许多肿瘤接种方案不能诱导CD8+T细胞抗肿瘤应答(Buhrman和Slansky 2013)。因此，APC的有效抗原呈递在诱导适应性免疫中起关键作用。

膜联蛋白包含钙和磷脂结合蛋白家族。除了真菌外，在所有真核生物王国以及植物和动物中已发现了20多个成员。膜联蛋白的分子量在30到40kDa之间(仅膜联蛋白VI是66kDa)，并且具有明显的结构特征。每个膜联蛋白成员上的膜联蛋白氨基末端结构域在序列和长度上是不同的(范围从11到196)。相比之下，由四个(仅膜联蛋白VI为八个)包含约70个氨基酸残基的α-螺旋结构域组成的羧基末端区在膜联蛋白中是非常保守的。钙和磷脂结合位点位于羧基末端结构域中。所有膜联蛋白的Ca²⁺结合相似性是由于它们共同的一级结构，独特的N-末端结构域(“尾部”)和保守的C-末端结构域(“核心”)。除膜联蛋白VI外，保守的C-末端结构域通常包含-70个氨基酸的4个重复序列(膜联蛋白VI含有8个)，其含有被称为“内联蛋白折叠”的增加的同源区。除了C末端核心外，膜联蛋白还包含明显更多变的N端头。正是这个结构域赋予每种膜联蛋白在多种细胞过程中的独特功能，包括：胞吞作用和胞吐作用，细胞骨架调节和膜电导以及组织作用。鉴于它们参与了各种各样的过程，因此膜联蛋白还涉及一系列疾病病理就不足为奇了。虽然没有直接归因于膜联蛋白功能失调的单一疾病状态，但是有几种病理状况显示被联蛋白改变。Fatimathas和Moss(Fatimathas和Moss，2010)讨论了关于越来越多的膜联蛋白在癌症、糖尿病和自身免疫性病症抗磷脂综合征进展中的作用的证据。