[发明专利]用于检测宿主细胞蛋白的组合物和方法

说明书

除了其他以外，本申请公开了用于在产品(例如，重组蛋白，例如抗体)生产过程中对宿主细胞蛋白进行检测和/或定量的方法和组合物。

相关申请

本申请要求2016年4月14日提交的美国临时申请号62/322,621的优先权，其全部内容通过引入并入本申请。

技术领域

本公开内容涉及在产品(例如重组蛋白，例如抗体)生产过程中对宿主细胞蛋白杂质进行检测和/或定量的方法。

背景技术

宿主细胞蛋白(HCP)是一种不需要的宿主蛋白的复杂混合物，其可能存在于经过多种生产工艺后的最终产品中。除了其他以外，那些HCP可能对产品的有效性和患者的安全性构成风险。因此，需要对最终的生物医药产品中的HCP进行检测和定量的方法。

发明内容

除了其他以外，本公开内容提供了一种用于检测HCP的具有较高灵敏度的方法。在一个方面中，本申请公开了用于检测、监测、鉴定或定量含有重组多肽的样品中GS-CHO宿主细胞蛋白(HCP)的方法，所述方法包括：a)提供或获得含有重组多肽的样品；b)将所述样品与固定化于固体支持物上的多克隆抗-GS-CHO HCP抗体接触并进行孵育以形成固定化的抗体-GS-CHO HCP复合物；c)将所述样品与所述固定化的抗体-GS-CHO HCP复合物分离；d)将所述固定化的抗体-GS-CHO HCP复合物与同GS-CHO HCP结合的可检测抗体接触；e)使用用于所述可检测抗体的检测方法检测与所述抗体结合的GS-CHO HCP的存在情况；f)任选地对所检测的GS-CHO HCP的水平进行定量；g)任选地对所检测的一种或多种GS-CHO HCP进行鉴定；以及h)任选地对所鉴定的所述一种或多种GS-CHO HCP进行定量。

在一些实施方式中，重组多肽是均聚物或异聚物多肽，例如，激素、生长因子、受体、抗体、细胞因子、受体配体、转录因子或酶，优选地抗体或抗体片段，例如人源抗体或人源化抗体或其片段，例如来源于小鼠、大鼠、家兔、山羊、绵羊或奶牛抗体(通常是家兔来源的)人源化抗体或其片段。在一些实施方式中，重组多肽是治疗性多肽。在一些实施方式中，重组多肽是表1中公开的多肽。在一些实施方式中，重组多肽是表2中公开的多肽。在一些实施方式中，重组多肽是抗体。在一些实施方式中，抗体是单克隆抗体。在一些实施方式中，单克隆抗体是治疗性抗体。

在一些实施方式中，样品来自在所述重组多肽生产过程中的下游处理步骤。在一些实施方式中，样品来自在所述重组多肽生产过程中的上游处理步骤。在一些实施方式中，样品来自所述重组多肽的最终产品。在一些实施方式中，所述方法包括来自在所述重组多肽生产过程中的一个或多个步骤的2、3、4、5、6、7、8、9、10或者10个以上样品。在一些实施方式中，可检测抗体是直接可检测的。在一些实施方式中，可检测抗体是通过荧光测定试剂放大的。在一些实施方式中，可检测抗体是生物素化的以及检测方法是抗生物素蛋白或抗生物素蛋白链菌素-过氧化物酶和3,3′,5,5′-四甲基联苯胺。

在一个方面中，本公开内容提供了生产重组多肽药品的方法，所述方法包括：a)提供或获得重组多肽制品的样品；b)将所述样品与固定化于固体支持物上的多克隆抗-GS-CHO HCP抗体接触并进行孵育以形成固定化的抗体-GS-CHO HCP复合物；c)将所述样品与所述固定化的抗体-GS-CHO HCP复合物分离；d)将所述固定化的抗体-GS-CHO HCP复合物与同GS-CHO HCP结合的可检测抗体接触；e)使用用于所述可检测抗体的检测方法对与所述捕获试剂结合的GS-CHO HCP的水平进行定量；以及f)如果所述GS-CHO HCP的水平低于预先设定的参照水平，则将所述制品的至少一部分加工成药品，从而生产重组多肽药品。