[发明专利]衍生自精氨酸富集结构域的经修饰抗菌肽

说明书

一种抗菌肽，该肽包含2至20个可变结构域，每个可变结构域为2至20个连续碱性氨基酸的序列，其中(a)所述可变结构域通过可变接头而彼此分开，(b)所述可变接头除两个以上连续碱性氨基酸之外可具有1至20个任意氨基酸，并且(c)所述肽具有不超过100个氨基酸。

背景

抗生素已被用于治疗细菌感染超过60年。近期，具抗生素抗性的细菌的数量增加已造成公共卫生的主要威胁。用于临床治疗的新抗生素的开发有急迫的需求。来自各种物种的抗菌肽(Antimicrobial peptide，AMP)可作为宿主对抗病原微生物的防御武器。因为它们可经由不同的作用方式杀死细菌，抗菌肽被认为是克服抗生素抗性的潜在候选方式。

概述

在一个方面，本文描述了一种抗菌肽。所述肽包含2至20个可变结构域，每个可变结构域是2至20个连续碱性氨基酸的序列，其中(a)所述可变结构域通过可变接头而彼此分开，(b)所述可变接头除两个以上连续碱性氨基酸之外具有1至20个任意氨基酸，以及(c)所述序列具有不超过100个氨基酸。在一实施方案中，所述肽具有至少3个或4个可变结构域。所述肽具有C-端半胱氨酸。在一些实施方案中，在可变结构域中至少一个碱性氨基酸是精氨酸。例如，在所述肽的每个可变结构域中所有碱性氨基酸可为精氨酸残基。备选地或另外地，在该抗菌肽中至少一个可变结构域具有赖氨酸。在一实施方案中，至少一个可变结构域具有组氨酸。所述肽可以具有环状结构。

在该肽中至少一个碱性氨基酸可以是经化学修饰的氨基酸。在一实施方案中，该经化学修饰的氨基酸是D-氨基酸，例如D-精氨酸。所述可变结构域和所述可变接头可衍生自嗜肝DNA病毒核心蛋白的精氨酸富集结构域(arginine-rich domain of ahepadnavirus core protein，HBcARD)。在一实施方案中，该HBcARD包含嗜肝DNA病毒核心蛋白的残基147至C-端残基的序列。在该肽中每个可变结构域可具有3个或4个精氨酸残基并且在该肽中每个可变接头可具有2至4个氨基酸。该肽可对革兰氏阳性细菌、革兰氏阴性细菌、真菌、寄生虫、或病毒表现出广谱抗菌活性。

在一实施方案中，所述抗菌肽包含选自由以下各项组成的组的共有序列：

(i)(X₁)GRX₂P(X₃)X₄PX₅P(X₆)X₇QX₈P(X₉)(SEQ ID NO：1)，其中X₁、X₃、X₆、和X₉中的每个独立地是可变结构域，并且X₂、X₄、X₅、X₇、和X₈中的每个独立地是任意氨基酸或不存在，

(ii)(X₁)GRX₂P(X₃)X₄PX₅P(X₆)(SEQ ID NO：2)，其中X₁、X₃、和X₆中的每个独立地是可变结构域，并且X₂、X₄、和X₅中的每个独立地是任意氨基酸或不存在，以及

(iii)(X₁)X₂PX₃P(X₄)X₅QX₆P(X₇)(SEQ ID NO：3)，其中X₁、X₄、和X₇中的每个独立地是可变结构域，并且X₂、X₃、X₅、和X₆中的每个独立地是任意氨基酸或不存在。每个可变结构域是2至20个连续碱性氨基酸的序列。