[发明专利]腺相关病毒变体衣壳和其使用方法

权利要求书

1.一种变体腺相关病毒AAV衣壳蛋白，相对于相应的亲本AAV衣壳蛋白，所述变体AAV衣壳蛋白包括在衣壳蛋白的GH-环中共价插入的由氨基酸序列LAISDQTKHA (SEQ ID NO:28)组成的异源肽，其中所述肽共价插入的亲本AAV衣壳蛋白的氨基酸序列来源于SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列或包含具有相对于SEQ ID NO:2的一个或多个以下氨基酸取代的SEQ IDNO:2所示的氨基酸序列：M1L、L15P、P34A、N57D、N66K、R81Q、Q101R、S109T、R144K、R144M、Q164K、T176P、L188I、S196Y、G226E、G236V、I240T、P250S、N312K、P363L、D368H、N449D、T456K、S463Y、D472N、R484C、A524T、P535S、N551S、A593E、I698V、V708I、V719M、S721L和L735Q。

2.根据权利要求1所述的变体AAV衣壳蛋白，其中插入位置位于对应于SEQ ID NO:2所示的AAV2的VP1的氨基酸587和588的氨基酸之间。

3.根据权利要求1所述的变体AAV衣壳蛋白，其中所述衣壳蛋白包括相对于SEQ ID NO:2所示的AAV2的VP1的P34A氨基酸取代。

4.根据权利要求1所述的变体AAV衣壳蛋白，其中所述衣壳蛋白包含SEQ ID NO:42所示的氨基酸序列。

5.根据权利要求3所述的变体AAV衣壳蛋白，其中所述衣壳蛋白由SEQ ID NO:42所示的氨基酸序列组成。

6.根据权利要求1所述的变体AAV衣壳蛋白，其中与包含相应的亲本AAV衣壳蛋白的AAV病毒粒子对视网膜细胞的感染性相比，所述衣壳蛋白赋予感染性重组AAV rAAV病毒粒子对视网膜细胞增加的感染性。

7.一种分离的核酸，其包含编码根据权利要求1-6中任一项的变体AAV衣壳蛋白的核苷酸序列。

8.一种感染性rAAV病毒粒子，其包含根据权利要求1-6中任一项的变体AAV衣壳蛋白。

9.根据权利要求8所述的rAAV病毒粒子，还包含异源核酸，其包含编码基因产物的核苷酸序列。

10.根据权利要求9所述的rAAV病毒粒子，其中所述基因产物是蛋白或短干扰RNA。

11.根据权利要求10所述的rAAV病毒粒子，其中所述变体AAV衣壳蛋白包含SEQ ID NO:42所示的氨基酸序列，和其中所述异源核酸包含编码拉布Rab护送蛋白1蛋白的核苷酸序列。

12.根据权利要求11所述的rAAV病毒粒子，其中所述变体AAV衣壳由SEQ ID NO:42所示的氨基酸序列组成。

13.根据权利要求12所述的rAAV病毒粒子，其中编码拉布Rab护送蛋白1蛋白的核苷酸序列与CAG启动子可操作地连接。

14.根据权利要求10所述的rAAV病毒粒子，其中所述变体AAV衣壳蛋白包含与SEQ IDNO:42所示的氨基酸序列具有100%氨基酸序列同一性的氨基酸序列，和其中所述异源核酸包含编码视网膜色素变性GTP酶调节子蛋白的核苷酸序列。

15.根据权利要求14所述的rAAV病毒粒子，其中所述变体AAV衣壳由SEQ ID NO:42所示的氨基酸序列组成。

16.根据权利要求15所述的rAAV病毒粒子，其中编码视网膜色素变性GTP酶调节子蛋白的核苷酸序列与视紫红质激酶启动子可操作地连接。