[发明专利]一种抑制K-RAS基因表达的siRNA及其前体和应用

权利要求书

1.一种前体序列，其特征在于，其5’至3’端具有式I所示的结构：

B1为所需要的第一核糖核酸序列，其中所述的第一核糖核酸序列包括K-RAS siRNA正义链序列；

B2为与B1基本互补或完全互补的序列，且B2与C不互补；所述的基本互补指所述B2与B1有2-8个碱基不互补；

C为茎环结构序列GUUUUGGCCACUGACUGAC；

所述的A1为UGCUG；且所述的A2为CAGG或CAGGA；

其中，所述K-RAS siRNA正义链的核苷酸序列选自序列表中：SEQ ID NO:263；

其中，所示的前体序列能在宿主中加工形成K-RAS siRNA；

所述前体在宿主中表达所述的第一核糖核酸序列，而不表达与所述第一核糖核酸序列互补的第二核糖核酸序列。

2.如权利要求1所述的前体序列，其特征在于，所述的基本互补指所述B2与B1有3-5个碱基不互补。

3.如权利要求1所述的前体序列，其特征在于，所述的基本互补指所述的B2较B1缺失1-2个碱基。

4.一种多核苷酸，其特征在于，所述的多核苷酸能被宿主转录形成权利要求1中所述的前体序列。

5.一种表达载体，其特征在于，所述的表达载体含有权利要求1所述的前体序列或权利要求4所述的多核苷酸。

6.一种药物制剂，其特征在于，所述的制剂含有：

(a)用于表达抑制K-RAS基因表达的siRNA的表达载体；以及

(b)药学上可接受的载体；

且所述表达载体表达权利要求1所述的前体序列。

7.一种药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物含有权利要求1所述的前体序列、或权利要求5所述的表达载体，和药学上可接受的载体。

8.如权利要求7所述的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物含有如权利要求5所述的表达载体。

9.如权利要求7所述的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物含有权利要求1所述前体序列的质粒。

10.如权利要求7所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物的剂型包括片剂、胶囊剂、粉剂、丸剂、颗粒剂、糖浆剂、溶液、混悬液、或乳剂。

11.如权利要求7所述的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物的剂型为注射剂。

12.如权利要求11所述的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物的剂型为静脉注射剂或腹腔注射剂。

13.如权利要求7所述的药物组合物，其特征在于，所述的药物组合物的施用方法包括：口服、呼吸道、注射、透皮、粘膜或腔道给药。

14.如权利要求7所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物的施用方法包括直接注射质粒。

15.一种抑制K-RAS基因表达的siRNA，其特征在于，所述siRNA的正义链核苷酸序列为SEQ ID NO:263所示的序列。

16.如权利要求1所述的前体序列、权利要求5所述的表达载体，或如权利要求15所述的siRNA的用途，其特征在于，(i)用于制备K-RAS的抑制剂；和/或(ii)用于制备抗K-RAS高表达恶性肿瘤的药物组合物；其中，所述的恶性肿瘤选自下组：肺癌、结直肠癌、或胰腺癌。